A halálos ebolavírus-járvány példátlan kitörése Nyugat-Afrikában, amely az európai kontinensre való átterjedéssel fenyeget. Az AIDS, amely emberek tízmillióit pusztítja el, és más, korábban ismeretlen szörnyű emberek, állatok és növények betegségei. Hol esnek a fejünkre? Milyen szerepet játszanak ebben a CIA és az amerikai katonai osztályok titkos laboratóriumai?

"Nem lehet! A rák nem fertőző! Mindezek kitalációk, például „összeesküvés-elméletek” vagy találkozások marslakókkal! Így reagáltak az amerikai hatóságok a venezuelai kormány vádjaira, miszerint a bolivári forradalom nagy vezérét, Hugo Chavezt egy rákvírussal megfertőzték.

A szakértők azonban úgy vélik, hogy a latin-amerikai (és baloldali!) vezetők ekkora száma, akik megközelítőleg egy időben betegedtek meg rákban, nem magyarázhatók természetes okokkal. Közöttük van Chávez mellett Néstor Kirchner argentin elnök, aki követte hivatalában, Cristina Kirchner, az utána hatalomra került I. Lula da Silva brazil elnök, Dilma Rousseff és a paraguayi elnök, Fernando Lugo (akit a hivatalában megbuktattak). jobboldali puccs 2012-ben). Fidel Castro kubai vezető alig élte túl a rejtélyes bélrákot, amely a 2006-os népi csúcstalálkozó után sújtotta az argentin Cordobában.

Kevesen tudják, hogy jóval a második világháború idején a német haláltáborokban végzett brutális koncentrációs táborkísérletek előtt az amerikaiak hasonló kísérleteket végeztek Latin-Amerika lakóival a Rockefeller Institute for Medical Research égisze alatt.

Az egyik fanatikus, Cornelius Rhodes 1931-ben ezt írta barátjának: „Itt Puerto Ricóban minden csodálatos, kivéve a Puerto Ricó-iakat. Kétségtelenül ők a legpiszkosabb és leglustább degeneráltjai az ezen a féltekén élő tolvajfajtának. A közegészségügy érdekében bizonyos eszközökre van szükség mindegyikük elpusztításához. És mindent megtettem, hogy felgyorsítsam ezt a folyamatot – nyolcat megöltem a kísérletek során, és sokakat megfertőztem rákkal. Itt nincs egészségbiztosítás vagy szociális ellátás – ezt csodálják azok az orvosok, akik szabadon gyógyíthatják halálra és kínozhatják szerencsétlen pácienseiket.”

A "Doktor" intravénásan rákkeltő biológiai anyagokat fecskendezett be, és legalább 13 beteg halt meg e kegyetlen kísérletek következtében.

Az 1950-es években Rhodes a marylandi Fort Detrick Hadseregközpont vegyi és biológiai fegyverekkel kapcsolatos kutatási programjainak igazgatója lett, a Utah-sivatagban és a Panama-csatornában lévő teszthelyeken, majd csatlakozott az Amerikai Energia Bizottsághoz, amely a gyanútlan amerikaiakat radioaktív sugárzásnak tette ki. a „biztonságos sugárzás” szintjének és a rosszindulatú daganatok előfordulásának meghatározására e kísérletek eredményeként.

Rhodes halála után az Amerikai Rákszövetség díjat alapított a nevében. 2004-ben azonban, vad kísérleteinek botrányos leleplezései nyomán az egyesület elnöke, S. Horwitz bejelentette, hogy az amerikai onkológusok legmagasabb kitüntetését a továbbiakban nem Rhodes nevéhez fűzik az „ellentmondásos természet” miatt. tevékenységéről.”

Az Egyesült Államokban egy tucat ilyen gazember volt a tudományból, és szinte az összes általuk kitalált fertőzést tesztelték, először Latin-Amerikában (nem feledkezve meg a saját állampolgáraikon végzett kísérletekről sem). A háború után a terület beszűkült, mivel sokan a Szovjetunióhoz fordultak orvosi és tudományos segítségért. Ám a Szovjetunió összeomlása után valóban határtalan távlatok nyíltak meg ezeknek a flancosoknak.

Obama már többször kénytelen volt bocsánatot kérni a latin-amerikai országoktól a 40-es, 50-es években embereken végzett kísérletek miatt, amelyek a szifilisz és más nemi úton terjedő betegségek terjedéséhez, tömeges meddőséghez és különféle járványokhoz vezettek. Egy ilyen bocsánatkérés azonban (csak a megcáfolhatatlan bizonyítékok közzététele után!) nem fogja újjáéleszteni az amerikai bioterrorizmus több millió halottját és áldozatát, és nem vezet az ilyen „kísérletek” leállításához a jövőben (a „ha az elv szerint” nem fogták el, nincs tolvaj”).

A 60-as évek vége óta megindult a rákvírus különféle módosításainak felgyorsult fejlesztése és létrehozása. A munkát a Nemzeti Rákkutató Intézettel egyeztették, amely hivatalosan is kidolgozta az „évszázad betegségének” kezelését, és nem hivatalosan részt vett a CIA olyan projekteiben, amelyek a rákvírus katonai és politikai célokra való felhasználását célozták.

Annak ellenére, hogy 1972-ben Moszkvában, Londonban és Washingtonban ünnepélyesen aláírták a bakteriológiai (biológiai) és toxinfegyverek kifejlesztésének, előállításának és felhalmozásának tilalmáról, valamint megsemmisítésükről szóló egyezményt (BTWC), a munka Fort Detrickben javában folyt, és 1977-re 60 ezer liter karcinogén és immunszuppresszív vírust termeltek.

A munkában aktívan részt vett R. Purcell, M. Hillerman, S. Kragman és R. McCollum professzorok, akik a hepatitis B vírus „koktélját” egy onkogén anyaggal kombinálva nem csak rhesus makákókon és csimpánzokon végzett kísérletekhez használtak. a Willowbrook State School for Mentally Retarded Children amerikai diákjai felett is.
1971-ben a Lytton Bionetics amerikai gyógyszergyár szerződést kötött számos afrikai országgal a fertőző Epstein-Barr-oncovírussal összefüggő Birkett limfómában szenvedő rákos betegek, valamint a leukémia és a szarkóma vizsgálatára. Érdekes, hogy a Birket limfómát először Ugandában fedezték fel, miután az Egyesült Államok Nemzeti Rákkutató Központjának laboratóriumai, valamint a Rockefeller által szponzorált más egészségügyi intézmények ott működtek.

Az egyik szakértő, R. King a 80-as években azt mondta, hogy az Egyesült Államok szakemberei szarkómával fertőzték meg az embereket, hogy „regenerálással, hibridizációval, vírusok rekombinációjával, mutációkkal és egyéb technikai technikákkal izolálják a vírus genomját”.

A szenátus egyházi bizottságának 1975-ös meghallgatásán Dr. Charles Senseney, aki a Fort Detrick-i laboratóriumban dolgozott, elismerte, hogy a CIA olyan biológiailag aktív anyagokat használt, amelyek múlandó szívbetegségeket és rákot okoztak, hogy elpusztítsák a nemkívánatos alakokat. Fegyvermintákat mutatott be, amelyekkel a szándékolt áldozatokat megfertőzték. Volt köztük egy esernyő is, amely kinyitva miniatűr dartsokat lőtt, valamint egy speciális fúvópisztoly fagyott mérgező anyagból készült tűk kilövésére. Ezek a tűk olyan vastagok, mint egy emberi hajszál, és több milliméter hosszúak, sérülés nélkül áthaladtak a ruhaszöveten, és befecskendezve fájdalmas érzést okoztak, amely nem rosszabb, mint egy szúnyogcsípés, és azonnal feloldódtak a bőr alatt.

Az amerikai bioterroristák „új termékei” között bemutatták a „célpontok” halálos betegségekkel való megfertőzésére szolgáló aeroszolokat is repülőgépről történő permetezés után, valamint „ugróvírusokat”, amelyek rovarokon (bolhák, pókok, szúnyogok) keresztül terjednek, amelyek fertőzött állatokról ugrálnak vagy repülnek. az embereknek. A CIA a fertőzési módszerek „úttörőjévé” is vált: injekciókkal, belélegzéssel, a szennyezett ruházat bőrével való érintkezéssel, az emésztőrendszeren keresztül evéssel, ivással, sőt fogkrémhasználattal is.

Számos szakértő úgy véli, hogy az egyik első olyan politikai vezető, akit az Egyesült Államok nem szeretett, és akit megfertőztek egy új rákkeltő biofegyverrel, Angola elnöke, Agostinho Neto volt. A moszkvai Központi Klinikai Kórházban 1979-ben, 57 éves korában halt meg a fulmináns rák egy eddig ismeretlen formájában. Egy másik áldozat Chile volt elnöke, Eduardo Frey volt, aki nyíltan szembeszállt Pinochet tábornokkal. Frey egy Santiago-i kórházban halt meg 1982 januárjában, miután rutinszerű orvosi vizsgálaton átesett egy ismeretlen, fulmináns betegségben.

Így talán 50 év múlva a CIA archívumát feloldják, és Hugo Chavez és a világ más vezetőinek halálának titkai is ismertté válnak. Olyan hatalmas mennyiségű dokumentáció áll rendelkezésre a rákvírusok amerikai hírszerző ügynökségek általi felhasználásáról, hogy ezeknek a fegyvereknek a létezése nem vet fel kérdéseket. A kérdés csak az, hogyan „hozták be”, és ki volt a közvetlen elkövető.

* * *

„A következő 5-10 évben lehetőség nyílik olyan szintetikus vírus létrehozására, amely a természetben egyáltalán nem létezik, és amelyet az emberi immunrendszer nem képes elnyomni; az új, mesterségesen létrehozott vírusok hozzáférhetetlenek lesznek a gyógyszerek számára, hiába használjuk a fertőző betegségek hagyományos kezelési módszereit, antibiotikumokat, vakcinákat és ellenszereket. Ilyen szenzációs kijelentést tett D. MacArthur, a hadsereg virológus főszakértője, amikor 1969-ben felszólalt az Egyesült Államok Kongresszusa ("Sykes Commission") bizottsága előtt, amelynek ajánlásokat kellett volna tennie a hadsereg költségvetési forrásainak elosztására vonatkozóan. És keveset kért - csak körülbelül 10 millió dollárt!

Pénzt osztottak ki, és több száz kutatót és szakértőt vontak be a munkába. Az AIDS-vírus egyik megalkotója nyilvánvalóan Dr. Robert Gallo volt, aki 1987-ben még szabadalmat is kapott az Egyesült Államok egészségügyi minisztériumától, amely meghatározta elsőbbségét egy „az emberi immunrendszert elnyomó vírus” feltalálásában.

A betegség kikerült a laboratóriumokból, és először 1981 tavaszán fedezték fel Kaliforniában (USA). És ennek semmi köze (ahogy az amerikaiak próbálnak minket meggyőzni) Afrikához és a „kis zöld majmokhoz”.

1987 májusában egy cikk jelent meg a London Timesban, amelyben azt állították, hogy Afrikában a himlő elleni oltások (amelyeket az Egyesült Államok Egészségügyi Minisztériumának "humanistái" kezdeményeztek) AIDS-járványt okoztak. És emberek milliói kaptak védőoltást! Aztán hasonló „oltást” végeztek Haitin, Brazíliában és más országokban.

Az Egyesült Államokat az AIDS-vírus gyártásával vádolják a 80-as évek közepén. A berlini Humboldt Egyetem professzora, Jakob Segal azzal érvelt, hogy a vírus "egy laboratóriumban végzett kísérlet eredménye, amelynek célja biológiai fegyver létrehozása". Az amerikai médiában mindezt „szovjet propagandaként” mutatták be. De a 90-es években maga Dr. Gallo bejelentette, hogy tesztelte az AIDS egy másik, „alternatív” törzsét, amely a hámsejteken keresztül (azaz a bőrön keresztül) bejuthat a szervezetbe, növelve a betegség kialakulásának kockázatát a permetezés révén. hatóanyag kerül a légkörbe.

Dr. S. Monteith az elsők között volt, aki még 1981-ben leírta az új vírusban rejlő hatalmas járványügyi potenciált, a „világelit” általi használatának esetlegesen katasztrofális következményeit, és bebizonyította mesterséges természetét is.

Ez az új minőség pedig eddig megakadályozta az AIDS elleni vakcina létrehozására irányuló kísérleteket. Éppen ezért az évek során egyetlen hatékony gyógyszert sem hoztak létre e betegség ellen.

Az AIDS-szel fertőzöttek száma egyelőre nem ismert, ugyanis a kormány még az Egyesült Államokban is megakadályoz minden olyan kezdeményezést, amely még a hozzávetőleges létszámot is megcélozza. Különféle becslések szerint 50-100 millió ember fertőzött AIDS-szel. Leginkább Afrikában – egyes országokban (Uganda, Kenya) a lakosság több mint 50%-a szenved ettől a szörnyű betegségtől.

Úgy gondolják, hogy a mai napig körülbelül 40 millió ember halt meg AIDS-ben – csaknem ugyanannyian, mint ahányan a második világháború idején!

* * *

Az Egészségügyi Világszervezet adatai szerint a „sötét kontinens” nyugati részén már több mint 600 ebolával fertőzött ember halt meg.

A betegség jelenlegi kitörése az orvosi megfigyelések történetében a legnagyobb mértékűvé vált.
Nigériában, Libériában és más afrikai országokban speciális kordonokat helyeznek el a határokon, az orvosok pedig gondosan figyelnek minden belépőt és távozót. Az Ebola-láz halálos betegségnek számít, amelyre az emberek, a főemlősök és a sertések a leginkább érzékenyek. Nincs rá vakcina.

A járvány ez év márciusában kezdődött Guineában. A mai napig a betegség Sierra Leonéban, Libériában és Maliban terjed új területekre. Félő, hogy nemcsak Nyugat-Afrikában, hanem Európába is behatol.

Érdekes, hogy a járvány melegágyain meredeken megszaporodtak a helyi lakosok az Orvosok Határok Nélkül nemzetközi szervezet irodái ellen elkövetett támadások. A helyi lakosok azzal vádolják az orvosokat, hogy a vírust a régióba vitték. Hatalmas tiltakozó tüntetések voltak az afrikai kormányok ellen, amelyek semmit sem tesznek a helyzet javítása érdekében.

Egy „tiszteletben álló nemzetközi szervezet” irodáinak pogromjait a nyugati sajtó az „irracionalitás és abszurditás” példájaként mutatja be. Ezenkívül az „Orvosok határok nélkül” minden lehetséges módon magasztalja etikai elveiket, biztosítva, hogy „mindig az áldozatok közelében legyenek”. De nem a saját áldozataik, ahogy az „ésszerűtlen” afrikaiak hiszik?

Miért nem hagyják el makacsul a nyugati orvosok Guineát, Libériát, Malit és Sierra Leonét? Hiszen ezeket az országokat elnyeli a polgárháborúk és konfliktusok káosza, amelyben az európai országok és az Egyesült Államok is aktívan részt vesz. Egyedül Franciaország több száz millió eurót költött katonai műveletekre Maliban.

Mindent - a gyarmati hatalom helyreállítására Nyugat- és Észak-Afrikában. És ezeket a területeket „megtisztítják” a helyi lakosságtól az Ebola és más fertőző betegségek járványai során. Ráadásul meglepő módon csak a helyi lakosok szenvednek, de a francia „békefenntartók” nem.

A „határok nélküli orvosok” pedig nem adnak át gyógyszereket és felszereléseket a helyi hatóságoknak, és nem hagyják el a konfliktusövezetet. Pontosan ez az, ami jó okot ad arra, hogy a helyi lakosok azt gyanítsák, hogy a külföldi „aesculapians” ők terjesztik az afrikaiak között új fertőzési törzseket.

Sok szakértő szerint új „etnikai” fegyvereket tesztelnek ott, amelyek szelektíven hatnak - csak afrikaiakra. De nyilvánvalóan vannak módosítások más faji és etnikai csoportok esetében is. 2006-ban az egyik vezető amerikai virológus, Eric Pianka a Texasi Egyetemen tartott ünnepi ülésen azt mondta, hogy az Ebola-láz új fajtája segítségével (szavai szerint „fantasztikus halálozással”) lehetséges „ a bolygó javára”, hogy 90%-kal csökkentsék az emberiséget. A teremben jelenlévő amerikai virológusok egyöntetűen felálltak, és vastapsot adtak neki...

* * *

A 70-es évek óta az Egyesült Államokban felgyorsult az „etnikai fegyverek” fejlesztése. És amint sok szakértő úgy véli, a halálos vírusok új törzseit találták fel, amelyek csak bizonyos etnikai környezetben terjedhetnek.

Így a „SARS” leginkább a kínaiakat és a délkelet-ázsiai lakosokat, az ebolát és az AIDS-et – afrikaiakat – érinti. Hasonló biológiai fegyvert próbálnak létrehozni izraeli tudósok az arabok ellen.

A British Medical Association nemrégiben kijelentette, hogy „a genetika progresszív fejlődése példátlan mértékű etnikai tisztogatáshoz vezethet az elkövetkező években”.

A „világ feletti biológiai uralom” megteremtésének gondolata már nem csak az őrült kannibál virológusok fejében érlelődik, hanem a politikusok, katonai stratégák és szakértők számításaiban is! Így ezt az elképzelést nemrégiben hangoztatták tekintélyes neokonzervatív amerikai politikusok „New Frontiers for America’s Defense” című jelentésben.

Kimondja, hogy természetesen a világ feletti katonai uralmat elsősorban ballisztikus és cirkáló rakétákkal, rádióvezérlésű repülőgépekkel („drónokkal”) és tengeralattjárókkal, valamint műholdas fegyverekkel kell biztosítani. De ezzel együtt „az elkövetkező években a légi, szárazföldi és tengeri hadviselés művészete teljesen más lesz, mint a jelenlegi, és új dimenziókban vívják majd a csatákat - az űrben, a kibertérben is. mint intracelluláris és mikrobiális szinten." A továbbiakban pedig azt mondják, hogy „a biológiai fegyverek fejlett formái, amelyek bizonyos emberi genotípusokat választanak ki célpontként, képesek lesznek ezt az irányt a terror világából a megillető helyére vinni a politikailag indokolható eszközök között”!

* * *

Az amerikai hatóságok jól megtanulták a Manhattan-projekt tanulságait, különös tekintettel arra, hogy a világ vezető fizikusai atomfegyverekre vonatkozó adatokat továbbítottak a Szovjetuniónak. Az amerikai tudósok ezt nem pénzért tették, hanem kormányuk józan értékelése alapján, amely habozás nélkül bombázná a Szovjetuniót és az összes többi potenciális versenytársat a világuralom felé vezető úton.

Ezért az új vírusok fejlesztőire most a legszigorúbb szabályok vonatkoznak a „nem kívánatos tanúk” eltávolítására. A halálozási arány közöttük a statisztikai átlag tízszerese.

Független amerikai szakértők száznál is több „rejtélyes” halálesetet számoltak össze (repülő- és autóbalesetekben, „ismeretlen” betegségekben, „balesetekben”) a CIA és a védelmi minisztérium szerződése alapján dolgozó virológusok és mikrobiológusok között.

2001-ben, közvetlenül a „palacsintatornyok” felrobbanása után, minden amerikait megriadt a magazinok, újságok, tévétársaságok és politikai személyiségek szerkesztőségeibe eljuttatott lépfene spórákat tartalmazó levelek híre. 17 ember fertőződött meg, öten meghaltak. Ezek a levelek voltak a fő oka annak a politikai fordulatnak, amely az Egyesült Államok Irak elleni agresszióját irányította. Az al-Kaida a homályba merült, és az összes média arról számolt be, hogy „az Egyesült Államok történetének legnagyobb biológiai támadását” Szaddám Huszein szervezte.

Amikor ezt a csavart megerősítették (és később Husszeint biológiai fegyverek kifejlesztésével vádolták, ami az egyik érv lett Irak megszállása mellett), gyorsan világossá vált, hogy a vírus törzsét csak a CIA Fort-i laboratóriumából lehet beszerezni. Detrick. Ott találtak egy „gyenge láncszemet” - Bruce Ivins virológust, aki hithű katolikus lévén gyakran panaszkodott, hogy vallási okokból nem szereti a munkáját. 2008 júliusában pedig állítólag öngyilkosságot követett el erős drogok lenyelésével. Ezek után az FBI „őrült terroristaként” jelölte meg, aki fertőzést tartalmazó leveleket küldött. Boncolásra nem került sor, nyomozás nem történt, az ügyet gyorsan lezárták.

Érdekesség, hogy megismételte az 50-es évek egyik vezető mikrobiológusának, Frank Olsonnak a sorsát, aki szintén lépfenével foglalkozott, és Fort Detrickben nyújtotta be lemondását, mivel nem akart részt venni halálos fegyverek fejlesztésében. Néhány nappal később, 1953 novemberében pedig az FBI jelentése szerint „idegösszeroppanásban kiugrott a Pennsylvania Hotel 10. emeletéről”.

Az egyik leghíresebb eset a legnagyobb brit biofegyver-szakértő, David Kelly „öngyilkossága”. Több tucatszor járt Irakban különböző ENSZ-missziók keretében ellenőrzés céljából. Az invázió után szenzációs (első!) kijelentést tett arról, hogy az Egyesült Államok és a brit hatóságok által az ENSZ-ben bemutatott, S. Husszein vegyi és bakteriológiai fegyvereinek jelenlétéről szóló összes „dokumentum”, amely a háború ürügyéül szolgált. , „durva hamisítványok” voltak. Beidézték a parlamentbe, ahol a meghallgatásokon lényegében nem engedték kinyitni a száját, szemrehányásokkal és vádaskodásokkal támadta.

Néhány nappal később, 2003. július 17-én, mint mindig, elment egy reggeli sétára, és holttestét másnap fedezték fel egy mérföldnyire otthonától. A hivatalos jelentés szerint öngyilkosságot követett el, amikor lenyelt 30 altatót, majd késsel elvágott egy vénát a bal csuklójában. De a mentőorvosok (nyilván nem tudtak a „rendről”) megjegyezték, hogy a holttest alatt nincs vér. Következésképpen Kelly megmérgezte magát, eret vágott, majd vérezve ő maga is eljutott arra a helyre, ahol megtalálták!

Az Egyesült Államokban az egyik leghírhedtebb esemény a 2002. márciusi repülőgép-szerencsétlenség volt, amelyben Stephen Mostow, a Colorado Medical Centerben dolgozó vezető virológus meghalt. "Mr. Influenza"-nak hívták, mert főként erre a betegségre specializálódott.

Az elhunytak között sokan voltak hazánkból, akik különböző okokból Nyugatra mentek „boldogságot keresni”. A legszembetűnőbb a 2001-es „szívroham” volt V. Pasechnik mikrobiológusnál, aki irigylésre méltó egészségben volt. A Nyugat (mint sok más oroszt) 200%-ban felhasználta – mind szakértőként, mind „a Kreml Egyesült Államok és az egész szabad világ elleni szörnyű összeesküvésének leleplezőjeként”.

1989-ben Angliába ment, és ott dolgozott az egyik virológiai központban. Útközben pénzt keresett a „Novicsok” nevű szovjet „bináris biológiai fegyverről”, amely szerint az összes ismert vírust régóta elsajátították a KGB titkos laboratóriumaiban, és már megjelentek az újak. „Szörnyű betegségeket” okozhatnak, például szklerózis multiplexet és ízületi gyulladást a gyanútlan amerikaiakban.

Ezek a rémtörténetek hasznosak voltak, mert ürügyet adtak a „biovédelem” (a valóságban új, halálos törzsek kifejlesztésére) szánt költségvetési források kicsikarására. De aztán úgy döntöttek, hogy a bőbeszédű Pasechnik túl sokat beszél a sailsburyi virológiai központról, ahol 10 évig dolgozott, és egy másik világba küldte...

* * *

„Putyin rakétája”, „Moszkva keze”, „Putyin, megölted a fiamat!” - A nyugati magazinok és újságok tele voltak ilyen címekkel, miután idén július 17-én Ukrajna ege fölött lelőtték a Boeing utasszállító repülőgépét, amely Hollandiából Melbourne-be repült. Ez a hisztéria közvetlenül Obama amerikai elnök beszéde után kezdődött, aki azt mondta, hogy ez „elképzelhetetlen méretű bűncselekmény”, és Oroszországot hibáztatta. Rögtön a Fehér Ház és a Külügyminisztérium sajtótitkárainak kezében megjelent néhány elmosódott fénykép, amelyek a CIA-tól érkeztek, és „cáfolhatatlanul jelezték”, hogy a repülőgépet egy orosz Buk rakéta lőtte le.

Ez az esemény volt az oka az Oroszország elleni gazdasági szankciók teljes körű bevetésének, az EU-országok bevonásának (a katasztrófa előtt haboztak, hogy támogassák-e az Egyesült Államokat), szinte minden tiltott hadieszköz alkalmazását az ellenállás elnyomására. Novorosszijában (beleértve a foszforbombákat, ballisztikus rakétákat, kazettás robbanófejeket stb.) egy oroszellenes katonai blokk létrehozására vonatkozó tervek végrehajtása Ukrajna, Moldova, Lengyelország, Grúzia és a balti országok részvételével.

Csak egy hónappal később kezdtek megjelenni olyan anyagok, amelyek szerint a pilótafülkében és a törzsben lyukak bizonyítják, hogy a gépet a levegőben lőtték le, valószínűleg az ukrán légierő egyik vadászgépe. Ezt a verziót erősíti meg, hogy a Boeing útvonala közvetlenül a katasztrófa előtt élesen megváltozott. A tett azonban már megtörtént, az összes nyugati média azonnal megfeledkezett a gépről, és a szankciók és a teljes körű háború az orosz nép ellen Kelet-Ukrajnában nemcsak érvényben vannak, hanem tovább fokozódnak.

A „kiváltó eseménynek” vagy a „hamisított incidensnek” (hamis zászlós incidensnek) minden jele van – így nevezik a CIA provokációinak mesterei azokat a terrortámadásokat, amelyek célja, hogy a közvéleményt az Egyesült Államok számára szükséges irányba fordítsák. Államokban, hogy elindítsa az események láncolatát, amely a „birodalom” célok megvalósításához vezet. Ez mindig is így volt az Egyesült Államok történelmében – saját Maine csatahajójának felrobbanása, amely ürügy lett 1898-ban Spanyolország elleni hadüzenetre; a Lusitania utasszállító gőzhajó tervezett elsüllyesztése, hogy az első világháború egy előnyös pillanata legyen; a Pearl Harbor-i amerikai támaszpont elleni 1941-es japán támadásról szóló információk szándékos elhallgatása, hogy beléphessen a második világháborúba; provokáció a Maddox amerikai romboló lövedékeivel a Tonkin-öbölben, hogy hadat üzenjenek Vietnamnak 1964-ben; az ikertornyok bombázása 2001-ben, hogy megkezdődjön a „terror elleni háború”, és felkészüljön Irak és Afganisztán inváziójára.

Ahogy az ilyen terrortámadásoknál gyakran megesik, nem egy, hanem több célt követnek. Ebben az esetben nagyon érdekes az az információ, hogy az MH17 fedélzetén száznál is több mikrobiológus tartózkodott, akik az ausztráliai AIDS-kongresszusra repültek. És köztük van J. Lange, az Amszterdami Egyetem vezető virológusa.

„Az AIDS tanulmányozásában a legnagyobb látnok és titán jóvátehetetlen elvesztését”, „az évszázad betegségeinek kezelésében a világ vezető szakemberének tragikus halálát” írták a tudományos folyóiratokban megjelent gyászjelentésekben. És valóban, Lange laboratóriuma vezető szerepet töltött be az AIDS tanulmányozásában és kezelési módszereiben, beleértve a gyógyszerek kombinált alkalmazását, az antiretrovirális terápiát, és kifejlesztette a vírus anyáról gyermekre való átvitelének megakadályozását. Több évig (2002–2004) az AIDS elleni küzdelem nemzetközi szervezetének vezetője volt. Vele együtt a fedélzeten voltak holland kollégái, Jacqueline van Tongeren, M. Adriana de Schutter, L. Vann Mens és más tudósok is. Lehetséges, hogy sok éves munka eredményét hozták magukkal, talán a régóta várt gyógymódot is erre a szörnyű betegségre – végül is nem sokkal a konferencia előtt Lange munkatársai azt mondták, hogy beszédének szenzációt kell kelteni a tudományos világban. .

Ugyanebben a Boeingben (állítólag sorsszerű egybeesés folytán) repült az Egészségügyi Világszervezet (WHO) képviselője, Glenn Thomas, akit azzal „bírságoltak” meg, hogy interjút adott, amelyben megemlítette szervezetének bűnözői szerepét az egészségügy terjesztésében. az ebolajárvány Nyugat-Afrikában.

Az európai AIDS-kutatók, valamint a WHO becsületes funkcionáriusának elpusztításával az amerikaiak leckét adtak mindazoknak, akik őszintén erőfeszítéseket tesznek az AIDS és az Ebola gyógyítására: „Nem kell kezelni és megelőzni ezeket a betegségeket, nagyon hasznosak minket a burjánzó emberi lárma elpusztításáért.”

Nem véletlen, hogy számos cikk felidézte, hogy 1998-ban az Atlanti-óceán felett lezuhant a Swissair repülőgépe, amelyen az egyik briliáns AIDS-kutató, Jonathan Mann és felesége, M. L. Clements, szintén híres virológus volt. Mann vezette a WHO AIDS-ellenes szervezetét, és ahogy kollégái írták, halála hatalmas csapást mért minden, e szörnyű betegség elleni küzdelem megszervezésére irányuló tervre. A katasztrófa okait egyelőre nem tisztázták (a komoly szakértők egyike sem hiszi el a hivatalos verziót, hogy az egyik pilóta cigarettacsikkje leesett, és ez tüzet okozott a gép belsejében).

* * *

Az Egyesült Államok a biofegyverek hatalmas arzenálját használja ellenünk: a GMO-k és a transzgenikus növények és szervezetek (amelyek közül sok nyugati szakértők szerint az immunrendszer elnyomását, rákot, meddőséget és agyi betegségeket okoz), évente több tucat új járványt szerveznek. influenzavírusok, állatbetegségek („sertés” és „madárinfluenza”), növények, különféle allergiás betegségeket terjesztenek, számunkra ismeretlen „mellékhatású” gyógyszereket, oltóanyagokat árusítanak, élelmiszer-adalékanyagokat stb. Egyre több új vírust fejlesztenek ki: a halálos „hantavírus”, a himlőn alapuló rekombináns „ausztrál gyilkos vírus”, a „nem halálos” (csak teljesen „elképesztő” betegségek új generációja), a „bioregulátorok”, amelyek tömegesen képesek depressziót létrehozni, megváltoztatni a szívritmust. , és álmatlansághoz vezet. Lehetséges, hogy biológiai „könyvjelzők” jönnek létre - látens vírusok, amelyeket egy bizonyos idő után aktiválni kell.

Amerikai katonai biológiai laboratóriumokat hoznak létre Oroszország körül: Grúziában (ahonnan a szakértők szerint 2013-ban indult ki a sertéspestis-járvány), Kazahsztánban, Kirgizisztánban és a balti államokban. Az amerikai hatóságok hatalmas összegeket különítenek el mind új vírusok kifejlesztésére, mind a biológiai védekezésre (csak a Bioshield programra évente több mint 6 milliárd dollárt költenek).

Hazánkban a Szovjetunió összeomlása után hosszú ideig szinte semmi figyelmet nem fordítottak az ország védelmének erre a legfontosabb területére. Az intézetek és központok bezártak, a fiatal szakemberek Nyugatra távoztak. Csak a lelkesek és az idős tudósok maradtak, akik csekély fizetésért dolgoznak (18 ezren a vezető kutatók, 27 ezren a professzorok, a tudomány doktorai).

Leromlott épületek, elavult berendezések, „további nyomás” a liberális hivatalnokok részéről. Odáig jutott, hogy 2000-ben „alulfizetés” miatt Chubais Mosenergo megpróbálta lekapcsolni az áramot az Ivanovszkij Virológiai Intézetben. Nemcsak a mikroorganizmusok egyedülálló gyűjteménye pusztulna el, de a vírusminták egy része a légkörbe kerülhet! Aztán csak a csoda folytán sikerült leküzdenünk a „hatékony menedzsereket”. A végső csapást pedig az Orosz Tudományos Akadémia „reformja” mérte - valójában annak felszámolása és a vezetés átadása egy „hatékony” krasznojarszki könyvelő kezébe.

Senki nem avatkozott be a CIA-ügynökök valódi vadászatába hazafias tudósok után, akiket egyszerűen megsemmisítettek hazánk területén! 2002 januárjában A. Brushlinskyt, az Orosz Tudományos Akadémia levelező tagját, a Pszichológiai Intézet igazgatóját, pszichológust és biológust, a terroristák felismeréséről szóló művek szerzőjét baseballütőkkel verték agyon (hogy tudják, hol van a parancs) mert felszámolásra jött!) és megfojtották moszkvai háza bejáratában. Két évvel halála után helyettesét, V. Druzsinin professzort megölték.

2002 novemberében B. Szvjatszkij professzor, a gyermekkori fertőzések specialistája az Orosz Állami Orvostudományi Egyetemről. Pirogov. Az Orosz Orvostudományi Akadémia levelező tagját, vezető virológus és mikrobiológus, L. Strachunsky biofegyver-specialista 2005-ben baseballütőkkel verték agyon a Moszkvai Szlavjanka Hotel szobájában. 2006-ban megölték L. Korochkin genetikust és biológust, az Orosz Tudományos Akadémia levelező tagját.

Hatalmas veszteséget okozott a hazai mikrobiológia számára az Orosz Állami Orvostudományi Egyetem Mikrobiológiai Tanszékének vezetőjének, V. Korsunov professzornak, a világ egyik vezető virológusának, a biológiai „fegyverelhárítók” elismert specialistájának halála. Az 56 éves tudóst 2002-ben „ismeretlen huligánok” verték agyon, néhány nappal azután, hogy megjelent egy újságcikk, amely szerint a tudós a legnagyobb felfedezés küszöbén áll - egy univerzális vakcina bármilyen biofegyver ellen! Korshunov halála következtében a tudomány legfontosabb területén leállt a munka. Oroszországban emberek százai, ha nem ezrei voltak halálra ítélve a kutatás leállása miatt.

A modern történelem tragikus lapjai meggyőznek bennünket arról, hogy az Egyesült Államok a világuralomra való mániákus vágyában minden, a legbarbárabb és legbűnözőbb cselekedetre képes. Lényeges, hogy azok az országok, ahová az „emberi jogok védelmének”, a „humanizmusnak” és a „demokráciának” az ürügyén behatolnak, nemcsak a legélesebb polgárháborúk színtereivé válnak, hanem különféle új, korábbi járványok is kísérik őket. ismeretlen betegségek. Vietnamban, Jugoszláviában és Irakban emberek hatalmas tömegei voltak kitéve mutagén anyagoknak, ami szörnyű következményekkel járt. Szörnyű torzulások a csecsemők között, egy egész degenerált nemzedék létrejötte, visszafordíthatatlan változások genetikai szinten, amelyek az összes jövő nemzedékét érintik - ezek a „humanitárius akciók” néhány következménye.

Sőt, a jelenleg teljes amerikai ellenőrzés alatt álló nemzetközi szervezetek, köztük az ENSZ, a „fedő” szerepet töltik be e népirtás végrehajtásában. Az Egészségügyi Világszervezet (WHO), az Orvosok Határok Nélkül és más, korábban tekintélyes szervek a Nyugat diktálása alatt írják „objektív jelentéseiket”, és már nem lehet bennük megbízni. Együtt léptek fel az agresszorokkal Irakban, Afganisztánban és Líbiában.

Az Egyesült Államok iraki inváziójának előestéjén engedelmesen arra a következtetésre jutottak, hogy Szaddám Husszein „hatalmas biológiai és vegyi fegyverkészletekkel rendelkezik”, ami az egyik fő érv volt az Egyesült Államok számára a háború indítására. Tavaly azzal vádolták a szír kormányt, hogy vegyi és biológiai fegyvereket alkalmazott népe ellen, amikor augusztusban mintegy 300 embert ölt meg szarin ideggáz Damaszkusz egyik külvárosában. Bár addigra már erős bizonyítékok érkeztek arra vonatkozóan, hogy a szarint az al-Kaida fegyveresei használták, és nem is bárhonnan, hanem amerikai raktárakból szerezték be.

* * *

A versenytársak kíméletlen pusztítása, sőt, az Egyesült Államok biológiai zsarnoksága lerombolja a világ perifériás országainak szuverenitását, és arra kényszeríti őket, hogy külföldi segítségre, szakértelemre és gyógyszerekre támaszkodjanak. Az ilyen gyarmati függőség aláássa a népek biztonságát, a Nyugat túszává, „laboratóriumi patkányává” teszi őket az egészségük és életük ellen irányuló különféle orvosi és biológiai kísérletekhez.

A bioterror birodalmának egyetlen ellensúlya az ördögi „globalizmus” elutasítása és a többpólusú világ felépítése lehet. Minden országnak lépésről lépésre meg kell tagadnia az együttműködést az Egyesült Államokkal és a NATO-val, a meglévő Amerika-barát nemzetközi szervezetekkel. Államközi szintű megállapodásokat kell kötni. Így Afrikában az államoknak együtt kell működniük az újonnan behurcolt Ebola-törzsek elleni küzdelemben. Délkelet-Ázsiában - a „SARS” legakutabb új szindróma ellen. Nemzeti szinten kell gondoskodnunk tudományunkról, saját nemzeti intézeteinket és laboratóriumainkat, erős tudományos központokat kell létrehoznunk a vírusos és genetikai fegyverek elleni küzdelemben.

Nyikolaj Ivanov

A vírusos betegségek laboratóriumi diagnózisának szakaszai. Virológiai laboratórium felállítása.

1) Vírus kimutatása (kimutatása) kóros anyagban:

Expressz módszerek:

a) Virionok kimutatása:

(1) Elektronmikroszkópia;

(2) Fénymikroszkópos vizsgálat (himlő);

b) Vírus Ag kimutatása szerológiai reakciókban (RIF, ELISA, RSK, RDP, RNGA);

c) Zárványtestek kimutatása fény- és fluoreszcens mikroszkóppal;

d) Virális nukleinsavak kimutatása PCR- és DNS-próbákkal;

e) hemagglutininek kimutatása RHA-ban;

f) A vírus fertőző aktivitásának kimutatása biomintában.

2) A vírus izolálása (izolálása) a kórokozó anyagból. Az izolálást az első szakasz eredményeitől függetlenül, biológiai teszttel, három „vak” szakaszban végezzük. Átjáró, átkelés egy élő rendszer fertőzése a vírus új populációjának megszerzése érdekében. "Vak" átjáró– fertőzés a vírusszaporodás látható jelei nélkül. Három passzázs után a vírus felhalmozódik egy élő rendszer sejtjeiben, amit a makroorganizmus szintjén látható szaporodási jelek megjelenése kísér. Például mikor biológiai teszt állatokon: klinikai tünetek, halálozás, kóros elváltozások; tovább csirkeembriók– halál, kóros elváltozások, hemagglutináció; tovább sejtkultúra– CPP, hemadszorpció, plakkok, RIF stb. Az ilyen fertőzött élő rendszereket pozitív biológiai tesztnek tekintik. A fertőző ágens típusát azonban még nem lehet pontosan meghatározni. Ezért a kóros anyagot pozitív biomintából választják ki, amelyet hagyományosan másodlagosnak tekintenek, pl. pozitív biológiai teszt jeleit mutató élő rendszerből választották ki. Vírustartalmú szuszpenziót vagy ujjlenyomat-tamponokat (izolált vírus) készítenek belőle.

3) Az izolált vírus azonosítása (típusának meghatározása) szerológiai reakciókban vagy PCR-analízissel. Ritka esetekben más jellemzők alapján is azonosítható, például intracelluláris zárványokkal (Babes-Negri testek veszettség esetén).

4) Ha szükséges, az izolált vírus etiológiai szerepének bizonyítéka. Erre a célra szerológiai reakciókat alkalmaznak, amelyekben az izolált vírust antigénként használják, és antitestként a vérszérum páros mintáit kétszeres sorozathígításban. Pozitív eredmény, amely az izolált vírus etiológiai szerepét bizonyítja, a második vérszérummintában az antitesttiter 4-szeres vagy többszörös növekedése az elsőhöz képest.

5) Retrospektív diagnózis. Erre a célra a gyógyulási szakaszban vett páros vérszérumokat használnak, amelyeket a vírusos betegség előzetes diagnózisának megfelelően egy standard specifikus antigénnel szerológiai reakciókban tesztelnek. A második minta antitest-titerének 4-szeres vagy többszeres növekedése az elsőhöz képest azt jelzi, hogy az állat szervezetében a vérvétel ideje alatt aktív fertőző folyamat zajlik le. Ebben az esetben a betegséget az a vírus okozza, amelyre a párosított szérumokban antitest-titer növekedést állapítottak meg.

Virológiai laboratórium felállítása.

A diagnosztikai laboratórium megszervezéséhez használjon legalább 5-6 helyiségből álló elkülönített rekeszt.

A laboratórium számára világos helyiséget biztosítanak. A vírusos anyagokkal való munkavégzés helyiségeinek jól megvilágítottnak kell lenniük, és egy elődobozból és egy dobozból kell állniuk, amelyeket ajtókkal ellátott üveg válaszfal választ el. A dobozokba csak asztalok, székek és munkafelszerelések kerülnek. Az asztalok felületét rozsdamentes acél, műanyag vagy üveg borítja, a munkafelület fölé baktériumölő lámpákat szerelnek fel. A doboz bejáratánál fertőtlenítő oldattal átitatott gumiszivacsos fertőtlenítő szőnyeg kerül. Az előbokszteremben a boksz céljának megfelelő steril ruházat és felszerelés található. A laboratórium hideg-meleg vízzel, szellőztetéssel, steril levegővel ellátott.

A bejövő kóros anyag regisztrálására szolgál recepció, ahol több horganyzott lemezekkel kárpitozott asztal és fertőtlenítő oldattal (3% klóramin, nátrium-hidroxid vagy 5% fenol) ellátott tartályok vannak elhelyezve.

Az anyag előfeldolgozó helyiségben ( Nyítás) nyissa ki a holttesteket, és válasszon anyagot a további kutatáshoz.

A dobozszobák rendeltetésüknek megfelelően vannak felszerelve.

Az autoklávban az edényeket, a táptalajokat, a berendezéseket és a táptalajokat sterilizálják, és a fertőző anyagot semlegesítik. Két autoklávra van szükség: a tiszta anyagokhoz és a fertőzöttekhez.

A mosóhelyiség az edények, berendezések és készülékek mosogatására szolgál.

A viváriumnak rendelkeznie kell karantén részleggel, egészséges és kísérleti állatok számára kialakított helyiségekkel és háztartási helyiségekkel.

Bármilyen típusú virológiai laboratóriumban kötelező része a laboratóriumnak egy asztali doboz, vagy ami még jobb, egy lamináris levegőellátású doboz.

46. ​​Sejttenyészetek és típusaik. Olyan rendszer, amelyben a szervezetből eltávolított sejtek, szövetek vagy szervek legalább 24 órán keresztül megőrzik életképességüket. Túlélés: amelyben a sejtek csak megőrzik saját élettevékenységüket anélkül, hogy szaporodnának. Növekedés: megőrzik eredendő élettevékenységüket és képesek szaporodni. A növekedés jellege szerint 3 csoportra oszthatók: felfüggesztés; plazma (rögzített szövetdarabok kultúrája); egyrétegű. Az egyrétegűek 4 csoportra oszthatók: elsődleges tripszinezett; szubkultúrák; félig ugrálható és átlapozható. Felfüggesztés: szuszpenziók formájában nőnek, a sejtek speciális táptalajjal szaporodnak, és hengerekkel folyamatosan keverik. A sejtek a matrac teljes felületén nőnek. Nagyszámú sejt az oltásokhoz. Vérplazma: plazmával rögzített szövetdarabok, ez a szövettenyészet. Úgy nyerik, hogy egy darab szövetet üveg virológiai üvegre rögzítenek, majd gödör táptalajt adnak hozzá és tenyésztik; ebben az esetben a sejtnövekedést egy szövetdarab perifériája mentén rögzítik. Szövetdarabok előállítására szolgál. Egyrétegű: Vírus jelzésére. Szövetekből vagy szervekből nyerik, tripszinnel kezelve. Az elsődleges kultúrákból oltással nyerik a szubkultúrákat. Következő, félig átültetett többszöri transzplantációval. Diploid kromoszómakészlettel rendelkeznek. Túlélheti a diploidot az életkortól vagy a szövettől függően, amelyből a sejttenyészetet nyerték. Ha az embrió legfeljebb 80 napos. Felnőtteknek - legfeljebb 25 transzplantáció. 5-nél nem több a régi.Az átültetettek mutáns sejtek, amelyek rákosak. Végtelen számú alkalommal kitartanak. Ezek egy rákos daganat transzformált sejtjei. A Hela a leghíresebb folyamatos sejtkultúra 1956 óta. Ez a kultúra a világ összes laboratóriumában jelen van. Számos kórokozóhoz alkalmazkodott. Az elsőszülött állatoknak számos előnye van: nem pusztulnak el; magasabb növekedési ütem; genetikailag mind homogének. Labortoriában úgy tartják fenn őket, hogy egyik edényből a másikba ültetik át őket.

59. CPD. Ez a módszer a vírus kimutatására sejttenyészetben. A CPD a sejttenyészetben a sejtekben a bennük szaporodó vírus hatására bekövetkező bármely változásra utal. Kis nagyítást használok, ha a matrac felső rétegét nézem. Hasonlítsa össze a fertőzött sejteket a nem fertőzöttekkel. Az eltérések kiterjedhetnek a teljes monorétegre vagy csak foltokban. Krisztában vagy pontban értékelik. Tehát, ha a CPU teljes monopóliuma megváltozott, akkor a becslések szerint 4 kereszt; ha ¾ - 3 kr; ½ x 2 kr; ¼ - 1 keresztre. A CPD formái a vírus biológiai tulajdonságaitól, a sejtek típusától, a fertőzés dózisától, a tenyésztési körülményektől stb. Egyes vírusok 2-3 nap, mások 1-2 nap után CPD-t mutatnak. A CPU 3 formája: töredezettség– a sejtek külön töredékekké való elpusztítása, amelyek az üvegből leválasztva a tenyészfolyadékba kerülnek. Kerekítés– a sejtek elvesztik az üveghez való kötődési képességüket, gömb alakúak, elkülönülnek és szabadon lebegnek ott, ahol elhalnak. Szimplaszt képződés– sejtmembránok feloldódása, melynek eredményeként a szomszédos sejtek citoplazmái egyesülnek, egyetlen egészet alkotva, amelyben a sejtmagok találhatók. Az ilyen képződményeket szimplasztoknak - óriási polifág sejteknek nevezik. Legalább 3 vak passzálást kell végrehajtani a vírus vizsgálati anyagban való jelenlétének megítéléséhez. A hemadsopció a vörösvértestek összekapcsolása a vírussal fertőzött sejtek felületével.

51. A vírustiter kiszámítása Reed és Mench szerint. A vírus titrálása statisztikailag értékelt hatással a titer kiolvasással és menüvel történő kiszámításával. Ehhez a titrálási módszerhez bármilyen biológiai modell használható, de ennek a modellnek érzékenynek kell lennie a titrálandó vírusra (sejtkultúrák, embriók, laboratóriumi állatok). A fertőzött biológiai modellek fertőző hatása szerint a következőkre oszthatók: klinikailag felismert; patomorfológiai változások szerint; a modell halálakor; a hemagglutinin felhalmozódásával. A munka eredménye a vírus dózisától függ. Megállapítást nyert, hogy a fertőző hatás 50 százalékát kiváltó vírus dózisa a legkevésbé érzékeny az ingadozásokra, és az összes lehetséges dózis közül a leginkább meghatározható. A titert effektív 50%-os dózisokban fejezzük ki. Ez az ED 50. Az alkalmazott biológiai modelltől és az elért hatástól függően az 50 százalékos dózis a következő mértékegységekben fejezhető ki: LD 50 – 50. azonosító ELD 50 EID 50 TsPD 50– ez a sejttenyészetekben CPD által meghatározott 50 százalékos citopatogén dózis. Ha a fertőzött rendszerekben nem figyeljük meg az ID 50 hatás 50 százalékát, akkor a titer kiszámítása a read and menu segítségével történik: lg LD 50 = lg ECD - (% év ECD - 50%) / (% év ECD - % év ECD) MINDEZT SZORZVA lg többszörösség szorzatával

36. Virológiai laboratórium szabályai és nyitva tartása. Minden tanulót oktatnak és képeznek biztonságos tr. A gyártóhelyiségbe illetéktelen személyek belépése, valamint köntös és cserecipő nélkül belépés tilos. Köntösben és sapkában a laboron kívülre menni tilos. Dohányzás, evés a laborban és élelmiszer tárolása. A laboratóriumba kerülő összes anyagot fertőzöttnek kell tekinteni. A munka végén a munkahelyet rendbe teszik és alaposan mentesítik. Fertőző anyagot tartalmazó edények címkézése. A kesztyűt viselő kezeket 5 százalékos klóramid oldattal ellátott tégelyben mossuk, majd a kesztyűt levesszük és másodszor is fertőtlenítjük, fertőtlenítjük és mossuk. ra A laboratórium virológusi munkája három fő elvre épül: megakadályozzák az alkalmazottak vagy vírustartalmú anyagokkal dolgozó személyek fertőzését. Kerülje el az anyag szennyeződését (a szerszámok, edények sterilek) a helyiségek fertőtlenítő oldattal történő tisztítása + ultraibolya lámpák. Akadályozza meg, hogy a vírus a laboratóriumon kívülre kerüljön (levegővel, edényekkel, szilárd és folyékony anyagokkal). A pipettákat és poharakat a sterilizálóba kell dobni. Kémcsövek vírusokkal, szövetekkel - autoklávba. Ne nyissa ki a centrifugát addig, amíg le nem áll. Csak a levegőt kell eltávolítania a fecskendőből egy 75 százalékos alkoholos pamut törlővel. Tilos a helyiséget szűrővel ellátott szellőztető rendszerrel szellőztetni.

37. Biztonsági óvintézkedések vírus tartalmú anyagokkal. Akadályozza meg a vírusok szétszóródását a külső környezetben. Akadályozza meg a vírustartalmú anyagok idegen mikroflórával való szennyeződését (szennyeződését). Biztosítsa a személyes biztonságot. E követelmények teljesítéséhez a következő munkaszabályokra van szükség: legyen figyelmes és ügyes; csak köntösben legyen és öltözz át a gardróbban; csak gombos mandzsettával, sapkával és gézmaszkkal dolgozzon; szigorúan tartsa be a tisztaságot és a rendet a laboratóriumban; ne legyenek idegen tárgyak az asztalon; Tilos a dohányzás és az étkezés. Használjon steril eszközöket és edényeket. Az égő lángja közelében dolgozzon edényekkel. Ne dugja az ujjait a szájába. Használt eszközök a sterilizátorban. A használt pipettákat fertőtlenítő oldattal ellátott edénybe kell gyűjteni. Gyűjtse össze a szilárd vagy folyékony hulladékot (vattát) speciális tartályokba a későbbi fertőtlenítéshez. Ne öntse a hulladékot mosogatóba vagy WC-be.

33. Az interferon antivirális hatásának mechanizmusa. Az interferonnak nincs közvetlen hatása a vírusra. Csak a sejtre hat azáltal, hogy aktiválja bizonyos sejtenzimek szintézisét. Különösen a protein-kináz enzim és a 2,5-oligoaszintetáz. Ezen enzimek szintézisével kapcsolatos információk a sejt génjeinek bizonyos régióiban is megtalálhatók, és szintén represszív állapotban vannak. Az air interf alatt a protein kináz és a 2,5 iligoAs szintetáz szintéziséért felelős gének derepressziója következik be. És szintézisük meredeken növekszik. 1) a protein kináz levegőjében az iniciáló faktor foszforálódik, ami biztosítja a vírus hírvivő RNS-ének a riboszómához való kötődését. Így a virális hírvivő RNS nem tud kapcsolatba lépni a sejt riboszóma apparátusával, azaz a transzláció kezdetével. És végül a vírusfehérjék és enzimek szintézise lehetetlenné válik. 2) interferon hatására aktiválódik a 2,5-oligo-Asynthetase szintézise, ​​amely katalizálja a 2,5-oligoadenilsav szintézisét a sejtben. Ez a sav megváltoztatja a sejtes nukleázok működését, hogy elpusztítsa a vírus hírvivő RNS-eit. Így az interferon hatására a következők fordulnak elő: a vírus hírvivő RNS transzlációjának blokkolása; a vírus hírvivő RNS-ek elpusztítása. Az interferon gátló hatása a sejtszaporodásra: Az interferon 0-1000 egység/ml koncentrációban elnyomja a sejtek széles skálájának szaporodását bármely szövetben. Az interferon számos sejttípus növekedését szabályozza, beleértve a primer sejttenyészeteket és a tumorsejteket. Egyes sejtfehérjék szintézisének elnyomásán és új fehérjék interferon általi szintézisén alapul. Az Inter növeli a T-limfociták gyilkos aktivitását. Nagy dózisban gátolják az antitestképződést. A kis dózisok éppen ellenkezőleg, serkentik az antitestek képződését. Krilling – a kis dózisú interfával kezelt sejtek több interfészt termelnek, mint a kezeletlen sejtek. Túl nagy adagok - az ellenkező folyamat.

35. A vírus és a sejt közötti kölcsönhatás típusai. Termékeny és sikertelen. A produktív litikusra és látensre oszlik. Termelő: Ez egyfajta kölcsönhatás, amelyben a virion új generációja képződik a sejtben. Ha a sejt gyorsan elpusztul egy új virion megszerzése után, akkor ez a vírus és a sejt közötti kölcsönhatás produktív lítikus útvonala. Ha a sejt, amelyben a vírus nő, hosszú ideig megőrzi életképességét (a bimbózás révén), akkor ez egy látens típusú kölcsönhatás terméke. Sikertelen: Ez a típus kölcsönös, ha a virionok szaporodása bármely szakaszban leáll, virion nem fejlődik. A vírus és a sejt kölcsönhatása következtében a következő változások következhetnek be a sejtben: sejtdegeneráció– a sejtek először szabálytalan alakra alakulnak át, majd lekerekednek, a citoplazmában szemcsésség jelenik meg, majd magfragmentáció, majd sejthalál. Az ilyen változásokat CPP-nek nevezik. Keresztben: 4 keresztezés – 100%-os hatékonyság. Szimplasztok kialakulása– többmagvú sejtek. Zárványtestek kialakulása– intranukleáris és plazmatikus mb, RNS vagy DNS tartalmú. Sejt transzformáció– onkogén vírusok (RNS retrovírusok). Az onkogén virs sejtben történő szaporodását nem kíséri CPD. A sejt folyamatosan vírust termel. Interferon szintézis.

4. A vírusok ellenállása fizikai-kémiai tényezőkkel szemben. Az állati vírusok rezisztenciáját viszonylag jól tanulmányozták, amikor külső tényezőknek vannak kitéve: hőmérséklet, sugárzás, ultraibolya, ultrahang, pH, formaldehid, fenol stb. Az ilyen hatások elleni védelem érdekében a virionok fehérjehéjjal rendelkeznek. A fehérjehéjak eltérő szerkezete és kémiai összetétele meghatározza a vírusok változó stabilitását. Ezektől a tulajdonságoktól függően ugyanaz a tényező egyes virionokat teljesen elpusztíthat, másokat nem. Például szerves oldószerek: azok a virionok, amelyek héjában nincsenek lipidek, ellenállnak ezeknek az anyagoknak, a lipideket tartalmazók pedig gyorsan elpusztulnak. A vírusok inaktiválása biológiai aktivitásuk teljes vagy részleges elvesztését jelenti, amely fizikai és kémiai tényezők hatására következik be. Amikor a vírus nukleinsavja és fehérje megváltozik, teljes inaktiváció következik be, vagyis a vírus összes biológiai tulajdonsága elveszik - csak fertőző tulajdonságait veszíti el, és megőrzi immunogenitását. A vírusra ható kémiai és fizikai természetű szerek természete és mértéke az inaktiváló faktor természetétől, a dózistól, hosszú ideig, a vírus típusától függ. Amikor a vírust inaktiválják, vagy a héj fehérjéinek hasadása, majd külön egységekre való szétesése következhet be, vagy a fehérjék tömörítése, miközben a héj általános szerkezete megmarad. A hasítás savas és lúgos környezetben, hosszan tartó és alacsony melegítés mellett figyelhető meg.Alvadás és tömörítés következik be, ha formaldehidnek, magas hőmérsékletnek vagy fenolnak van kitéve. Koncentrációtól és időtartamtól függ. Így bizonyos esetekben a fehérjék koagulációja a nukleáris savak elpusztulásával jár, és a vírus visszafordíthatatlan fertőzőképességének elvesztését tapasztalja. Más esetekben a vírus szaporodási képessége megmarad. Glicerinnel tartósítva.

60. PCR. A módszer elve: egy adott vírusra specifikus gént azonosítanak - a DNS-molekula egy olyan szakaszát, amely információt hordoz egy fehérje szintéziséhez. Ezt a gént ezután PCR-rel azonosítják a tesztanyagban. Ez a reakció lehetővé teszi a gén további másolatainak kialakulását - a DNS egy szakaszának amplifikációját egy kémcsőben. A vizsgálat céljától függően a mo faja vagy nemzetsége azonosítható. A PCR lényege: a DNS-molekulát 90-94 fokra hevítik. Ez a kettős hélix nitrogénbázisai közötti hidrogénkötések megsemmisüléséhez vezet, majd a DNS-polimiráz enzim jelenlétében 52 g-ra hűtjük. A sebesség ezt követő növekedése új DNS-molekula - egy komplementer templát - szintéziséhez vezet. Ezt az eljárást sokszor megismétlik, ami nagyobb töredékeket eredményez. Az indikációt elektroforézissel vagy jelölt DNS-próbával végezzük. Főbb összetevők: A DNS-polimiráz hőstabil; 20 nukleotidból álló oligonukleotid; trifoszfátok; erősítő, üvegedények és reagensek elektroforézishez agaróz gélben. Beállítás: DNS-minta vétele. Ehhez a vizsgált anyagot pufferben vagy desztillált vízben szuszpendálják. Adjunk hozzá nátrium-OH-t, és tartsuk 7 percig. A keveréket semlegesítjük. A lizátumot 10 percig centrifugáljuk, hogy a nagy részecskék ülepedjenek, majd a felülúszó folyadékot PCR-re használjuk. A PCR egy DNS-fragmens adott génjének amplifikációja. Ezután 3 órán át termociklerben olvasztják. Az amplifikáció jelzése – a mintát agaróz gélben elektroforézisnek vetjük alá a DNS elválasztása céljából. 30 perc elteltével az agaróz a berendezésben polimizálódik, és lyukak keletkeznek az agarózban. A keverékből 10 μl-t veszünk, és 5 µl festékkel összekeverjük. Az elegyet a lyukakba adjuk, és 40 percig elektroforézist hajtunk végre. A lemezt eltávolítjuk, és 10 percig bromidoldatban festjük. Az agarózt ezután átvilágítóra helyezzük, és a kapott sávmintákat lefényképezzük. Az ultraibolya sugárzás által feltárt sávok DNS-fragmensek.

49. Sejttenyészetek fertőzésének módja. Vírusok kimutatása sejttenyészetekben. Fertőzés: erre a célra folyamatos sejtes egyrétegű csöveket választanak ki. A tápközeget lecsepegtetjük, és a sejteket néhányszor Hank-oldattal mossuk. Minden csőbe 0,2-0,1 ml vírusanyagot adunk, és rázatással egyenletesen elosztjuk a teljes sejtrétegen. Ebben a formában a csöveket 1-2 órán át 22 vagy 37 fokon hagyják, hogy a vírus a sejtek felszínén adszorbeálódjon. Ezután a vírusanyagot eltávolítjuk a kémcsövekből, és a fenntartó közeget a kémcsőbe öntjük (1-2 ml). A vírus izolálása után az egyrétegű sejteket Hank-oldattal kétszer mossuk, majd öntjük a hordozó tápközeget. Jelzés: a CPD szerint; RGAd; plakkképződéssel; intracelluláris zárványok; ZÁTONY; elektronmikroszkópia

54. RTGA. RGA. RTGA: lényeg– ha a vírust speciális szérummal keverik, a vírus elveszti hemagglutináló tulajdonságait. Gólok– izolált vírus azonosítása; antitestek kimutatása a tesztszérumban és titerük. Alkatrészek– direkt szerovariánshoz: vírus tartalmú anyag, specifikus szérum, 1%-os vörösvérsejt-szuszpenzió, sóoldat hígításhoz. Retrospektív - tesztszérum, standard antigén bizonyos dózisban 4 GAE (vírus hígítási titer) 4 GAE - 1:32. Rendszer– minden szérumhígításhoz adjunk azonos térfogatú standard antigént (vírust) 4 GAE dózisban. Érintkezés 30 percig szobahőmérsékleten. Minden egyes szérumhígítású és állandó vírusdózisú 4 hektáron lévő üregbe adjon azonos térfogatú vörösvérsejt-szuszpenziót. Érintkezés 30-60 perc szobahőmérsékleten. Könyvelés a reakciókat cristae-ban hajtják végre. ha ez plusz, akkor nincs agglutináció, ha perc, akkor hemagglutináció. A tesztszérum antitest-titere a szérum maximális hígítása, amely teljesen késlelteti a vörösvértestek agglutinációját.RGA: lényege: a vírus adszorpciójában a vörösvérsejt felszínén, ami ragasztáshoz vezet. Célok: indikáció; vírustitráláshoz haenben. Összetevők: vírus; 0,5 vörösvérsejt szuszpenzió; sóoldat elkészítéséhez. Post-séma: készítsen kétszeres hígítást a vírusból; adjunk hozzá egyenlő térfogatú 0,5%-os vörösvérsejt-szuszpenziót minden egyes vírusfejlődéshez; érintkezés 30-60 perc szobahőmérsékleten. Számvitel: cristekben. 4 cristae – 100% agglutináció. 3 crist - 75% . 1 kereszt – agglutináció. 1 haen a vírus maximális hígítása, amely a vörösvértestek 50%-ának agglutinációját okozhatja.

57. ELISA. A lényeg: amikor az antigén + jelölt szérum kötődik, az enzim lebontja a szubsztrátot. Antigén+konjugátum komplex képződik, hogy színes reakcióterméket képezzen, fénymikroszkóp alatt vagy vizuálisan értékelve. Cél: azonosítás. Összetevők: vírusszóda anyag, konjugátum, szubsztrát. Beállítási séma: a sejtkulitrát hűtött acetonnal rögzítjük. Megszárítják és a konjugátumot felvisszük rájuk. Inkubáljuk 1-2 órán át 37 fokos hőmérsékleten párás kamrában. Mossa le sóoldattal, öblítse le desztillált vízzel és szárítsa meg. Néhány csepp szubsztrát oldatot csepegtetünk rá, 5-10 percig inkubáljuk, majd sóoldattal mossuk és híg vízzel leöblítjük. Számvitel: ebben az esetben, azaz antigén jelenlétében a konjugátum felvitele után egy enzimmel jelölt antigén plusz antitest komplex képződik. A szubsztrát felhordása után egy enzim hatására lebomlik, fénymikroszkóppal jól látható színes terméket képezve.

56. RSK. A lényeg: egy kompliment kötődése az antigén plusz antitest komplexhez. A szabad kompliment hiányát ebben a rendszerben a hemolizin visszatartása alapján ítéljük meg az indikátorrendszerben. Célok: azonosítás; antitestek kimutatása és titerük a vizsgált vérszérumban. Összetevők: 2 rendszer – 1 (vírustartalmú anyag; specifikus szérum;) (tesztszérum; standard antigén). 2) hemolitikus rendszer (indikátor) - a birka vörösvértesteinek 2-3% -os szuszpenziója antigén; hemolizin (hemolitikus szérum) egy antitest. Az antitestek az antigénnek felelnek meg. És dicséret csak 1 reakcióért: ha az első, akkor késik a hemolízis, amikor a bók érintkezik a vizsgált rendszerrel. Ha a második, akkor a vörösvértestek lizáltak, teljes hemolízis következik be. Beállítási séma: a reakciót először a vizsgált rendszerben hajtják végre, majd az indikátorrendszert ugyanabba a kémcsőbe adják. Számvitel: pozitív RSC – késleltetett hemolízis. Negatív – teljes hemolízis.

7. Vírusfehérjék. Aminosavakból áll. A vírusfehérje összetétele az aminosavak váltakozási sorrendjétől függ, ezt a sorrendet a vírusgenomban található genetikai információ határozza meg. A vírusfehérjék strukturális és nem strukturális fehérjékre oszthatók. A strukturális fehérjék az érett virionok részei. A nem strukturális b nem szerepel az érett virionokban, de a szaporodás bizonyos szakaszaiban kötelezőek. SzerkezetiNem szerkezeti

8. Vírus enzimek. Ezek fehérje természetűek. Közvetlenül a virionhoz kapcsolhatók, de nem kapcsolódnak – nem szerkezeti. a DNS-ben RNS esetén: RNS-függő DNS-polimiráz - a sejtben nincs jelen, az RNS-t és DNS-t tartalmazó „-”-hoz szükséges, amely a retroviridae vir családjában a vírusgenomot transzdukáló enzimet tartalmaz, az úgynevezett RNS-függő DNS-polimiráz. Ennek az enzimnek a neve: revertáz, reverz transzkriptáz. A vírusfehérjék képződésében részt vevő enzimek: proteázok, protein kenáz.

52. RN.Lényeg: Amikor a vírus kölcsönhatásba lép egy adott szérummal, a vírus elveszíti fertőző tulajdonságait, a sejtekben való szaporodási képességét. Célok: az izolált vírus azonosítása, az antitestek kimutatása a vérszérumban és az antitest-titer. Alkatrészek: vírus tartalmú anyag, specifikus szérum, biológiai modell. Ha retrospektív: teszt vérszérum, standard antigén, biológiai modell. Általános beállítási séma: keverje össze az antigént és az antitestet, érintkezés 30-40 percig, maximum 2 óra 37-38 fokos hőmérsékleten; antigén és antitest keverékét használják egy biológiai modell megfertőzésére; megfigyelés és számvitel. Könyvelés: a pozitív pH élőt, a negatív pH azt jelenti, hogy halott.

53. RDP.Lényeg: ugyanaz az antigén és antitest egymástól azonos távolságra elhelyezett agargélen diffundál egymás felé, és a találkozási ponton fehér csík formájában csapadékot képez. Célok: az izolált vírus azonosítása, antitestek kimutatása a tesztszérumban. Alkatrészek: vírus tartalmú anyag, specifikus szérum, agar gél. Retrospektív: teszt vérszérum, standard antigén, agar gél. Beállítási séma:üveglemezen agar bevonatot készítünk, lyukakat készítünk, a reakciókomponenseket meghatározott séma szerint adagoljuk a lyukakba, a reakcióelegyet tartalmazó üveget 37-38 C-os termosztátba helyezzük. A reakciót 48 óra elteltével rögzítjük. Pozitív reakció a fehér csapadéksáv kialakulása.

55. RGAd, RTGAd. RGAd: Lényeg: az eritrociták adszorpciójában a vírussal fertőzött sejtek felszínén. Célok: vírusjelzés. Alkatrészek: vírust tartalmazó anyaggal fertőzött sejttenyészet; vörösvérsejt szuszpenzió . Beállítási séma: egyrétegű sejttenyészetet előfertőzni a vizsgált anyaggal. A tenyészeteket hordozó táptalajba csöpögtetjük. Mossa le Hanks oldattal. Vörösvértest-szuszpenziót adunk hozzá. Érintkezés 5-15 perc szobahőmérsékleten. Könyvelés: fénymikroszkóp alatt végezzük. Pozitív – a vörösvértestek adszorbeálódnak a sejteken; negatív – a vörösvérsejtek szabadon lebegnek. RTGAd: lényeg: specifikus antitestek kötődésében a vírussal fertőzött sejtek felszínéhez, ami az eritrocita sejtek adszorpciójának gátlásához vezet. Célok: az izolált vírus azonosítása. Alkatrészek: szennyezett sejttenyészet; specifikus szérum; vörösvértestek szuszpenziója. Beállítási séma: egyrétegű sejttenyészetet előfertőznek egy egyrétegű kezdeti vírust tartalmazó anyaggal. Öntse tápközegbe, és adjon hozzá 0,8 ml specifikus szérumot. Kapcsolattartás 20-30 perc. Vörösvértest-szuszpenziót adunk hozzá. Kapcsolattartás 5-15 perc. Könyvelés: A vezérléshez telepíteniük kell az RGA-t. Számítás kísérleti csövekben: pozitív - a vörösvérsejtek szabadon lebegnek, negatív - a vörösvérsejtek is szabadon lebegnek. Elszámolás pozitív – adszorpciós, negatív – szabadon lebegő kontrollcsövekben.

6. Vírusos nukleinsavak.+ Az RNS egy virális nukleinsav, amely informatív RNS funkciót is ellát. Az RNS+ fehérjeszintetizáló rendszerére vonatkozó információk transzkripció nélkül azonnal átkerülnek a genomi RNS-be. Az -RNS-t tartalmazó vírusok egyszálú RNS-t tartalmazó vírusok, amelyek nem töltik be hírvivő RNS funkciót; az ilyen vírusokban a hírvivő RNS szintézise (transzkripció) a genomi RNS szálaitól megvont templáton megy végbe egy vírusspecifikus enzim segítségével, amely szorosan kapcsolódik. gnóm RNS-sel, RNS-függő RNS-polimirázzal. Vannak plusz és mínusz RNS-szálakat is tartalmazó vírusok, ezek közé tartoznak az adenovírusok és a paramixovírusok. A kétszálú DNS genomi információit mindkét szál kódolja, a nukleinsavakat egyedi nukleotidokból álló polinukleotidok képviselik. Nukleinsavban lévő mennyiségük változó. Mindegyik nukleotid 3 alegységből áll: egy foszforsav-maradékból, egy szénhidrátból és egy nitrogénbázisból.

9. A vírusok szerkezete. Alapformák. A szimmetria típusai. Felépítése: DNS: általában kétszálú, a géninformáció mindkét szálon kódolt. A vírus DNS-t lineárisan, körkörösen lehet elrendezni. Lehet egyszálú. Vírus RNS-ek: gyakran egyszálúak, ritkábban kétszálúak. Lineárisan, körkörösen elrendezve, töredezetten. Általában 11-12 töredékből állnak. Az egyszálú vir RNS kétféle lehet: plusz szálú és mínusz szálú RNS (negatív genom) A szimmetria típusai: a fehérje alegységek (kaposmerek) elhelyezkedése határozza meg a virion szimmetriájának típusát - spirális, köbös, kombinált. Spirál Ez egyfajta szimmetria, amelyben a kapsomerek helikálisan helyezkednek el a nukleinsav körül. A nagy vírusok és néhány közepes méretű vírus rendelkezik ilyen típusú SIM-kártyával. Forma: rúd alakú, poli alakú, gömb alakú, ovális. A pálcika alakú vírusoknál a kapszid a nukleinsav körül azonos átmérőjű spirálfordulatokban elhelyezkedő kapszomerekből áll, amelyek szorosan egymás mellett helyezkednek el.A gömb alakú vírusoknál a kapszomerek spirálisan, de eltérő átmérőjűek. Köbös típus: A legtöbb kisméretű vírus és a közepes méretű vírusok jelentős része rendelkezik vele. Az ilyen vírusok alakja gömb alakú. A kapszid kapszomerei a savmagok körül helyezkednek el, mint egy szabályos izometrikus test körül. Az ilyen vírusok fehérjehéja megközelíti az icosaider alakját, egy szabályos, 20 oldalú arcot. Kombinált szimmetria típusa: spirálból és köbösből áll. A coxviridae család összes fágja és néhány összetett vírus rendelkezik vele. Kocka alakú külső héjuk és spirális kapszid héjuk van. A fágoknak ikozindrikus fejük és spirális folyamatuk van.

18. A vírusszaporodás első fázisának főbb szakaszai. Ez a sejt fertőzésének fázisa, ebben a fázisban a virionnak kapcsolatba kell lépnie a sejttel, behatolnia a sejtbe és le kell vetkőznie. Első a virionok sejtfelszínen történő adszorpciós szakasza kétféleképpen fordulhat elő: fizikai-kémiai (nem specifikus); receptor (specifikus). A fizikai-kémiai folyamatot a vírusfehérjék pozitív töltésű csoportjai és a sejtfal negatív töltésű karboxinjai, szulfát- és foszfátcsoportjai között fellépő felületi elektrosztatikus erők kölcsönhatása határozza meg. A vírusfehérje-receptor és a sejtfal felszínén lévő komplementer receptorok specifikus kölcsönhatásán alapuló receptor. A vírusok receptorai és az adott vírusra érzékeny sejtek receptorai komplementer konfigurációval rendelkeznek (mint a zár kulcsa). Ha a sejt nem érzékeny, akkor a reabszorpció soha nem történik meg. Második penetráció – a különböző vírusoknál eltérő módon fordul elő: viropexiák segítségével; a héjak összeolvasztásával. Viropexis– ez az út hasonló a pinocitózishoz. Először a sejtfelszínen az adszorpció helyén a membrán sejtfalának invaginációja következik be, majd a membrán szélei összezáródnak a sejt belsejével, a virion minden membránjával megjelenik a sejtvakuólumban. Által fúzió- ilyenkor a vírushéj és a sejtmembrán egymást fogadó területei vírusspecifikus enzimek hatására megolvadnak és csak a vírus nukleinsav jelenik meg a sejtben, míg a vírus maradványai beépülnek a sejtbe membrán. Harmadik színpad– deproténáció – membránokból való felszabadulás – a vírus sejtbe jutásának útjaitól függ. Ha a deprotonizációt nem izolálják külön szakaszban a membránok összeolvadásával, akkor az a vírus behatolásával egyidejűleg megy végbe. Ha a behatolás viropexison keresztül történik, akkor a vírus nukleinsavának felszabadulása a burokból a vírusburkot alkotó fehérjék, lipidek és zsírok elpusztulása után kezdődik. Minden szakasz hőmérsékletfüggő.

20. Átírás. Ez a genetikai információ átírása a vírusnukleinsavból a vírusinformációs RNS-be, amelyet a genetikai kód törvényei szerint újonnan szintetizáltak. (a vírusnak be kell mutatnia a fehérjét a szintetizáló sejtnek, és RNS-vé kell alakítania). A transzkripció végterméke a vírus hírvivő RNS. Az egyszálú + RNS-ek nem rendelkeznek transzkriptumokkal, de genomi vírus RNS-ük rendelkezik a vir RNS információval. Az egyszálú -RNS-ben a genom nem tudja ellátni a hírvivő RNS funkcióját, és RNS-e a vírusspecifikus RNS-dependens RNS-polimiráz enzim segítségével transzfektálódik. RAJZ!

21. Adás. Ez a vírus hírvivő RNS-ekben található genetikai információ egy specifikus aminosavszekvenciává történő lefordításának folyamata. A transzláció akkor következik be, amikor a vírus hírvivő RNS-ébe ágyazott négy bázis 20 aminosavból álló kóddá alakul. A transzláció végterméke a vírusfehérjék. A fehérjeszintézis a sejt riboszómáin megy végbe. 3 fázisból áll: a fordítás kezdeményezése és a fordítás megkezdése; folytatás; megszűnés – az adás vége. Az iniciáció alapja a transzláció beindulásához szükséges komponensek komplexének kialakítása, vagyis az iniciációs komplex a riboszóma virális hírvivő RNS általi felismerésén és bizonyos, cap nevű területekhez való kötődésén is alapul. Ez a metilezett guanin. A kupak felismerése után a riboszóma lecsúszik a hírvivő RNS molekulán, amíg el nem éri azt a helyet, ahol az információ dekódolása megkezdődik.

5. A vírusok kémiai összetétele. A vírusok a következőkből állnak nukleinsavak (DNS, RNS). A nukleinsavakat egyedi nem nukleotidokból álló polinukleotidok képviselik. Mindegyik nukleotid 3 alegységből áll: egy foszforsav-maradékból, egy szénhidrátból és egy nitrogénbázisból. Vírusfehérjék : Aminosavakból áll. A vírusfehérje összetétele az aminosavak váltakozási sorrendjétől függ, ezt a sorrendet a vírusgenomban található genetikai információ határozza meg. A vírusfehérjék strukturális és nem strukturális fehérjékre oszthatók. A strukturális fehérjék az érett virionok részei. A nem strukturális b nem szerepel az érett virionokban, de a szaporodás bizonyos szakaszaiban kötelezőek. Szerkezeti A virionban elfoglalt helyüktől függően a vírusfehérjék a következő csoportba sorolhatók: kapszidfehérjék - a kapszidban; szuperkapszid b – szuperkapszidban (főleg fehérje, vannak zsírok és szénhidrátok is); mátrixfehérjék – a membránréteg fehérjéi; a vírusmag fehérjéit enzimek képviselik. Nem szerkezeti– az általuk ellátott funkcióktól függően a következőkre oszthatók: vírusgenom expresszió szabályozója; sejtbioszintézis-gátlók; sejtpusztító szerek; virális fehérje prekurzorok strukturális vir fehérjék; egyes vírusenzimek nem részei az érett virionoknak. Lipidek: komplex vírusokban főként a virion surercapsid héjának egy részében szerepelnek. Mindegyiket nem kódolja a vir genom, és sejtes eredetűek. Ezeket foszfolipidek és glikolipidek képviselik. Szénhidrátok: az obol szuperkapszid részei, a vírusgenom nem kódolja őket, és sejt eredetűek, amelyeket glikoproteinek és glikolipidek képviselnek . Vírus enzimek: Ezek fehérje természetűek. Közvetlenül a virionhoz kapcsolhatók, de nem kapcsolódnak – nem szerkezeti. A korai polimirázok és a korai replikázok enzimek részt vesznek az információváltozás szakaszában. A celluláris bioszintézis gátlóinak minősülnek. A vírusgenomot transzhibáló enzimek: a DNS-ben vírusokat tartalmazó - DNS-függő RNS-polimirázok jelen vannak a sejtben, egyes esetekben a vírusok számára hozzáférhetők, másokban nem. Lehet sejtes vagy vírusos eredetű. A sejtmagban szaporodó DNS-tartalmú vírusok sejtes eredetűek. A citoplazmában - vírus eredetű - vírusspecifikus.

RNS esetén: RNS-függő DNS-polimiráz - a sejtben nincs jelen, az RNS-t és DNS-t tartalmazó „-”-hoz szükséges, amely a retroviridae vir családjában a vírusgenomot transzdukáló enzimet tartalmaz, az úgynevezett RNS-függő DNS-polimiráz. Ennek az enzimnek a neve: revertáz, reverz transzkriptáz. A vírusfehérjék képződésében részt vevő enzimek: proteázok, protein kenáz.

13. Bakteriofágok. Baktérium vírus. DNS és RNS bakteriofágok ismertek. A legtöbb fág DNS kétszálú. Az RNS-fágok egyszálúak. A fág nukleinsavat poliéderes kapszid (fej) veszi körül, amelyhez sok fágban függelék (farok) kapcsolódik. A fejek átmérője hozzávetőlegesen 60-95 nm, a folyamatok hossza 250 nm, vastagsága 10-25 nm. A folyamat kötődési struktúraként szolgál a baktériumhoz. A b és a mikrobiális sejtek közötti kölcsönhatás összetett biológiai folyamat, melynek kimenetele a fágok tulajdonságaitól függ, és a baktériumsejtek lízisében nyilvánul meg. bakteriofágokat diagnosztikára használnak (antrax); bakteriális fertőzések kezelésére; inf (szalmonellózis) megelőzésére. RAJZ!

22. A vírus DNS replikációja.

23. Vírus RNS replikációja. Egyszálú RNS negatív genommal:

25. A virionok felépítése és kiszabadulása a sejtből.

: robbanás, szakadás, annak a sejtnek a pusztulása, amelyben érett virionok (egyszerű vírusok) keletkeztek, a sejt elpusztul. Az összetett struktúrák bimbózással jönnek ki, vagyis a sejtfalon keresztül jönnek ki és bimbóznak. Ebben az esetben a sejt nem azonnal pusztul el, hanem akkor, amikor a tartalékai elfogynak

19. A szaporodás második fázisa.Napfogyatkozási szakasz: információváltozás szakasza. Ebben a szakaszban a sejtgenom funkciója elnyomott, mivel a nukleinsav blokkolja a vírust, a vírusenzimek pedig blokkolják a sejt genetikai apparátusát és a sejt szintetizáló rendszereit. Ez azt eredményezi, hogy a sejt leállítja saját sejtkomponenseinek reprodukálását, és átvált külső komponensek reprodukálására. Itt a korai replikák és a korai polimirázok vesznek részt. Átírás: Ez a genetikai információ átírása a vírusnukleinsavból a vírusinformációs RNS-be, amelyet a genetikai kód törvényei szerint újonnan szintetizáltak. (a vírusnak be kell mutatnia a fehérjét a szintetizáló sejtnek, és RNS-vé kell alakítania). A transzkripció végterméke a vírus hírvivő RNS. Az egyszálú + RNS-ek nem rendelkeznek transzkriptumokkal, de genomi vírus RNS-ük rendelkezik a vir RNS információval. Az egyszálú -RNS-ben a genom nem tudja ellátni a hírvivő RNS funkcióját, és RNS-e a vírusspecifikus RNS-dependens RNS-polimiráz enzim segítségével transzfektálódik. RAJZ!Adás: Ez a vírus hírvivő RNS-ekben található genetikai információ egy specifikus aminosavszekvenciává történő lefordításának folyamata. A transzláció akkor következik be, amikor a vírus hírvivő RNS-ébe ágyazott négy bázis 20 aminosavból álló kóddá alakul. A transzláció végterméke a vírusfehérjék. A fehérjeszintézis a sejt riboszómáin megy végbe. 3 fázisból áll: a fordítás kezdeményezése és a fordítás megkezdése; folytatás; megszűnés – az adás vége. Az iniciáció alapja a transzláció beindulásához szükséges komponensek komplexének kialakítása, vagyis az iniciációs komplex a riboszóma virális hírvivő RNS általi felismerésén és bizonyos, cap nevű területekhez való kötődésén is alapul. Ez a metilezett guanin. A kupak felismerése után a riboszóma lecsúszik a hírvivő RNS molekulán, amíg el nem éri azt a helyet, ahol az információ dekódolása megkezdődik. Vírus DNS replikáció: Kétszálú DNS replikáció: Egy kettős szálú DNS-molekulát először 2 különálló szálra választanak szét celluláris nukleáz enzimek segítségével, majd vírusinformációs DNS keletkezik az egyik virális DNS-szálon, amelynek a mátrixa. Ez egy vírusspecifikus vagy sejtes enzim, a DNS-függő RNS-polimiráz segítségével történik. Ezután a vírus infor-RNS a sejt riboszómájába kerül, ahol a transzláció vírusfehérjék és enzimek, köztük a DNS-polimiráz enzim képződésével megy végbe. DNS-polimiráz segítségével egy második komplementer DNS-szálat építenek fel sejtnukleotidokból. Ily módon új kétszálú DNS-molekulák szintetizálódnak. Az egyszálú DNS replikációja: Az egyszálú DNS-szálak pozitív polaritásúak. A vírusspecifikus DNS-függő DNS-polimiráz enzim segítségével a vírus egyszálú DNS-mátrixán komplementer mínusz DNS-szál képződik. Egy kettős hélix szerkezetet szintetizálnak, amelyet replikatív formának neveznek. Ezután a templáton a replikatív forma mínusz szálai plusz egyszálú DNS szálakat képeznek úgy, hogy a plusz DNS szálakat kiszorítják a replikatív formából. A vírus RNS replikációja: Egyszálú RNS negatív genommal: Közvetlenül a sejtbe való behatolás után a transzkripció megtörténik a vírus inf RNS plusz képződésével. Ebben az RNS-dependens RNS-polimiráz vírusspecifikus enzim vesz részt. A Vir inf RNS ezután fehérjéket és RNS-polimiráz enzimet képez. Ezt követően az RNS-polimiráz segítségével a mátrixon plusz információs RNS-szálon leány egyszálú mínusz RNS szálak jönnek létre. Pozitív genommal rendelkező egyszálú RNS: A sejtbe való behatolás után az RNS azonnal kötődik a riboszómákhoz, ahol fehérjéket és enzimeket képez, beleértve az RNS-replikáz enzimet is. Ezután az RNS-replikáz hatására replikatív forma képződik. A templáton a replikatív forma mínusz RNS-e plusz RNS-szálak képét hozza létre azáltal, hogy kiszorítja azokat a replikatív formából. A kettős szálú vírus RNS replikációja: a hírvivő vírus RNS-ek szintézise egy kettős szálú RNS-templáton megy végbe, az RNS-függő RNS-polimiráz enzim segítségével. Átírás egy RNS-szál templáton, minden fragmens külön-külön íródik át. Ezután fehérjékké és az RNS-polimiráz enzim segítségével a hírvivő RNS plusz szálain transzlálódnak, hogy komplementer mínusz RNS-szálakat, azaz kettős szálú RNS-t képezzenek. A virionok összeállítása és kiszabadulásuk a sejtből: 2 stratégia a fertőzött sejtből való összeállításra, érésre és kilépésre: a sejten belüli összeszerelés és érés megvalósítása; a virion összeállítás utolsó szakaszának és a fertőzött sejtből való kilépésnek a kombinációja.

Az összeszerelés egyszerű aggregációval történik, azaz egy vir fehérje nukleinsavval való kombinációja fiziko-kémiai tényezők hatására megy végbe, azaz önszerveződés történik. Egyesítésen és specifikus nem fehérje és fehérje-nukleinsav felismerésen alapul. Nukleokapszid képződik. Az egyszerű vírusok esetében itt ér véget az önszerveződési folyamat. Az összetett vírusokban az önszerveződési folyamat eltérően megy végbe. A fehérjék egy része a nukleokapszid képzésébe kerül, amely az egyszerű vírusokhoz hasonlóan képződik, a fehérjék egy része pedig a sejtmembránba kerül. A képződött nukleokapszid ezután odaköltözik. A szuperkapszid héj kialakulása pedig akkor következik be, amikor a virion elhagyja a sejtet, azaz a nukleokapszid felülről a sejtmembránba került fehérjékkel borítja be, és a sejtből való kilépéskor a zsírok és szénhidrátok ebbe a külső héjba épülnek be. . Kétféleképpen lehet kilépni: robbanás, szakadás, annak a sejtnek a pusztulása, amelyben érett virionok (egyszerű vírusok) keletkeztek, a sejt elpusztul. Az összetett struktúrák bimbózással jönnek ki, vagyis a sejtfalon keresztül jönnek ki és bimbóznak. Ebben az esetben a sejt nem azonnal pusztul el, hanem akkor, amikor a tartalékai elfogynak.

62-63. Juh- és kecskehimlő(Carippoxvírus nemzetség). Birkák és kecskék fertőző ektímája(Parapoxvirus nemzetség).Család: poxviridae. DNS-t tartalmazó. A szaporodás jellemzői: a vírus genomja igen nagy, a fertőzött sejtekben is 6 óra elteltével fejeződik be a replikáció. A behatolás a vírus és a sejtmembránok fúziójával történik. A behatolás után a kettős szálú DNS felhasad, és mindkét DNS-szálon egyszerre kezdődik meg a replikáció. Ezenkívül a víruskomponensek szintézise a sejtek citoplazmájában történik. Virion-összeállítás a citoplazmában. Kilépés bimbózóval.

2. A vírusok szerepe az állatok fertőző patológiájában. Jelenleg a vírusos betegségek nagy jelentőséggel bírnak az állatok, emberek és növények fertőző patológiájában. Szerepük a bakteriális, gombás és protozoális betegségek mérséklésével és megszüntetésével nő. A vírusos megbetegedések körülbelül 80 százalékát teszik ki az orvostudományban és 50 százalékát az állatgyógyászatban. Több mint 500 vírus által okozott betegség ismert. A vírusos eredetet olyan különösen veszélyes betegségekben állapították meg, mint a ragadós száj- és körömfájás, marhapestis, sertéspestis stb. A virológia általánosra és specifikusra osztható. Általános tanulmányok a vírusok természetéről és eredetéről, osztályozásukról, szerkezetükről és kémiai összetételükről, genetikáról és szelekcióról, diagnosztikai és megelőzési módszerekről, az antivirális immunitás alapjairól. A privát vir tanulmányozza az egyes kórokozók nevét és szisztematikus elhelyezkedését, a virion szerkezetét, méretét és stabilitását, a terápiát, a diagnosztikai módszereket és a megelőzést.

1. Fejlődéstörténet. Az első időszak az ókortól 1892-ig kezdődik. Ebben az időszakban a virológia mint önálló tudomány nem létezett. A bakteriológusok ismeretlen etiológiájú betegségeket vizsgáltak. A második időszak – a virológia mint tudomány kialakulása – 1892-1950. ez az időszak az orosz botanikus, D. I. felfedezésével kezdődött. Ivanovsky (1898) a dohánymozaikbetegség kórokozójának rokonságáról. Ivanovsky a dohánybetegség etiológiáját tanulmányozva megállapította, hogy ezt a betegséget egy speciális apró mikroorganizmus okozza, amely áthalad a bakteriális szűrőkön. Fénymikroszkóp alatt láthatatlan. Mesterséges táptalajon nem nő. Ezt követően hasonló MO-kat izoláltak más növényekből, valamint állatokból és emberekből. Egy független csoportba egyesültek - ultravírusok. Az 1930-as években kezdték használni a csirkeembriókat a virológiai gyakorlatban. 1956-ban Stanley-nek sikerült felosztania a vírust fő összetevőire - fehérjére és nukleinsavra. A 20. század 40-es éveinek végén a Rudenberg elektronikus mikrok létrehozása. A világosat pedig Leeuwenhoek készítette. Szovjet tudósok, akik hozzájárultak a virológiához: Zhdanov, Likhachev, Syurin.

48. Eljárás egyrétegű, elsődleges tripszinezett sejttenyészetek előállítására. A vírus jelzéséhez egyrétegű sejtek szükségesek. Szövetekből vagy szervekből nyerik, tripszinnel kezelve. Az egyrétegűek 4 csoportra oszthatók: elsődleges tripszinezett; szubkultúrák; diploid vagy félig oltott; oltott. A szövetet összetörjük és tripszin enzimmel diszpergáljuk. Ezután centrifugálással eltávolítják a tripszint, és bizonyos térfogatú folyékony táptalajt adnak a kapott üledékhez. A sejteket egyetlen rétegben - egyrétegű - az üveg belső felületén növesztik. Állandóan szükség van az egészséges állatok szerveire. ÉS 9-112 napos embriókat használnak. Ovoszkópia. Shell feldolgozás. Olló segítségével vágja le a héjat a puga határa felett. Az embriót sterilen eltávolítják. Mossa le Hank oldatával. Bőr-izmos tasak készül. Mossa le Hank oldatával. A szövetet ollóval aprítják. Tegyük át tripszinező lombikba. A lombikot mágneses keverőre helyezzük 15 percre. A szuszpenziót jéggel ellátott edényben lehűtjük. Szűrjük egy lombikfogóba. A sejtszuszpenziót 10-15 percig centrifugáljuk. A tripszin eltávolításra kerül. A sejtüledékből kombinált masszát készítünk, 1 ml-es csövekbe öntjük, és a sejteket tenyésztjük.

47. Alapoldatok és táptalajok.Eredet szerint Vannak természetes etetőközegek és mesterséges etetőközegek. Naturals - biológiailag aktívak közül: embrionális, allantois vitalitás plusz kiegyensúlyozott sóoldatok hozzáadása. Mesterséges - egyedi összetevőkből készült. Leggyakrabban univerzális adagolóanyagot használnak, vagy lehetnek speciálisak. Univerzális közepes 199 és Igla közepes. A művészi tápközeg összetételének tartalmaznia kell aminosavakat, vitaminokat, enzimeket és kiegyensúlyozott sóoldatokat, esetenként indikátort (fenolvörös). Az indikátor lényege a vírus észlelése színváltoztatással. A sejt élete során a pH a savas oldalra változik. Savas környezetben az indikátor színe bíborvörösről sárgára változik. Néha normál vérszérumot adnak a táptalajhoz a táptalaj térfogatának 100 százalékában. A vérszérumot növekedési faktornak nevezik. Sejtburjánzás céljából adják hozzá, csak tápközegben . Felhasználási cél szerint: növekedési táptalaj - szérumot tartalmaz; alátámasztó – szérum nélkül. Kiegyensúlyozott sóoldatok: mindegyik sóoldat származéka. Alapjául szolgál a gödör táptalaj elkészítéséhez és a sejttenyészetekkel végzett minden manipulációhoz (valaminek mosásához). Ezek Hanks és Earle megoldások. Diszpergáló oldatok: sejtek másoktól és sejtek üvegtől való elválasztására. Pepszin, tripszin oldatok. Üvegből - versine megoldások. A versine oldat megköti a kalcium kationokat.

50. Vírustiter. A vírustiter a vírus mennyisége, azaz a vírustartalmú anyag egységnyi térfogatára jutó dózisa. 3 titrálási módszer: 1 módszer: a vírus titrálása a vírus fertőző hatásának megfelelően statisztikailag értékelt hatással. A read és a menchu ​​módszere szerint vagy Kerber szerint. A titert 50%-os dózisokban fejezzük ki. Ez az ED50. Ehhez a titrálási módszerhez bármilyen biológiai modell használható, de ennek a modellnek érzékenynek kell lennie a titrálandó vírusra (sejtkultúrák, embriók, laboratóriumi állatok). A fertőzött biológiai modellek fertőző hatása szerint a következőkre oszthatók: klinikailag felismert; patomorfológiai változások szerint; a modell halálakor; a hemagglutinin felhalmozódásával. A munka eredménye a vírus dózisától függ. Megállapítást nyert, hogy a fertőző hatás 50 százalékát kiváltó vírus dózisa a legkevésbé érzékeny az ingadozásokra, és az összes lehetséges dózis közül a leginkább meghatározható. A titert effektív 50%-os dózisokban fejezzük ki. Ez az ED 50. Az alkalmazott biológiai modelltől és az elért hatástól függően az 50 százalékos dózis a következő mértékegységekben fejezhető ki: LD 50 – Ez a laborba kapott halálos dózis 50 százaléka, ami a halálos hatás szempontjából él. 50. azonosító– ez egy 50 százalékos fertőző dózis, amelyet a laboratórium életben maradásához a klinikai tünetek vagy patomorfológiai változások alapján határoztak meg. ELD 50– ez egy 50 százalékos embrionális halálos dózis, amelyet a csirkeembriókon az eredmény évével határoznak meg. EID 50– ez egy 50 százalékos embrionális fertőző dózis, amelyet csirkeembriókban patomorfológiai változások és a hemagglutinin felhalmozódása határoz meg. TsPD 50– ez a sejttenyészetekben CPD által meghatározott 50 százalékos citopatogén dózis. Ha a fertőzött rendszerekben nem figyeljük meg az ID 50 hatás 50 százalékát, akkor a titer kiszámítása a read and menu segítségével történik: lg LD 50 = lg ECD - (% év ECD - 50%) / (% év ECD - %-os éves ECD) MINDEZET SZORZVA lg hígítási tényezővel. 2. módszer : a vírus fertőző hatásáról az egyetlen hatás értékelésével. A sejttenyészetben alkalmazott plakkképző módszerrel egyetlen hatás érhető el. Himlőképző egységekben vagy plakkképző egységekben kifejezve, PFU. Készítsen 10-szeres hígítást a vírusból; válasszon egy érzékeny biológiai modellt; A vírus minden hígításában legalább 4 embrió fertőzött. A titer kiszámítása a T=a képlet alapján történik, osztva V*n-nel. a - a foltok vagy plakkok átlagos száma. V az anyagtartalom térfogata = 0,2. n a vírus hígítási foka. 3. módszer: a vírus hemagglutináló hatása szerint a GAEN-ben. RGA-t raktak.

38. A vírusfertőzések laboratóriumi diagnosztikájának elvei.

A laboratóriumi vizsgálatok fontos szerepet játszanak a fertőző betegségek diagnózisának felállításában, az etiotróp terápia felírásában és a kezelés hatékonyságának ellenőrzésében. A specifikus laboratóriumi diagnosztika folyamata a kórokozó azonosításán és az emberi szervezet fertőző folyamat során adott válaszán alapul. Három szakaszból áll: anyaggyűjtés, szállítás (39. sz. spur) és laboratóriumi vizsgálat: 1) A virológiai módszer két fő szakaszból áll: a vírusok izolálása és azonosítása. A vírusok izolálásához sejttenyészeteket, csirkeembriókat és néha laboratóriumi állatokat használnak. A vírus jelenlétét a fertőzött tenyészetekben a specifikus sejtdegeneráció kialakulása határozza meg, pl. citopatogén hatás, intracelluláris zárványok kimutatása, valamint specifikus antigén immunfluoreszcenciával történő kimutatása, pozitív hemadszorpciós és hemagglutinációs reakciók alapján. A vírusok azonosítása immunológiai módszerekkel történik: hemagglutinációs gátlási reakció, komplementkötés, semlegesítés, gélkicsapás, immunfluoreszcencia. 2) Szerológiai reakciók; 3) Immunológiai módszer (biológiai vizsgálatok); 4) ELISA és PCR. A vizsgálati eredmények kézhezvétele után, valamint az epidemiológiai és klinikai adatok figyelembevételével megállapítják a végső diagnózist.

39. Szabadalom felvétele, előkészítése és továbbítása. Anyag virológus számára. Kutatás.

Gyűjtése, szállítása és vizsgálata a Pat. anyagát állat-egészségügyi jogszabályok szabályozzák. A felvétel során figyelembe veszik a vírus tropizmusát - a vírus preferált lokalizációját egy adott betegségben és patogenezist. Idő a patthelyzetből. anyag kutatásának végéig - 2-4 óra. Ha több időre van szüksége, tartsa be (kémiai módszerek - 50%-os glicerinoldat, fizikai - fagyasztás), de nem a luministáknak. mikroszkópia. Szállítás speciális konténerek kísérővel okmány és futár. Az előkészítés magában foglalja a vírus kinyerését a sejtekből. Folyékony anyag – szűrés és centrifugálás. A baktériumok tisztítására - bakteriális. szűrők és antibiotikumok (500-2000 egység 1 ml-ben), gombák esetében - fungicidek (25 egység 1 ml-ben), tartsa 30-40 percig, oltsa be pitatával. környezet (aerobok – MPA, MPB, MPZh, anaerobok – Kitta-Tarozzi, gombák – Chapeka, Saburo). Sűrű patentanyag: 1) vegyünk 1-1,5 g szabadalmi anyagot; 2) ollóval aprítani; 3) Mossa le steril. üveg vagy homok habarcsban; 4) 10%-os szuszpenzió Hanks oldattal; 5) fagyassza le és olvassa fel kétszer; 6) szűrés gézszűrőn keresztül; 7) centrifugálás (3000 ford./perc, 15 perc); 8) felülúszó folyadék - vírus tartalmú anyag, baktériumokra (táptalajokra) tesztelik, antibiotikumokat és gombaölő szereket adnak hozzá.

40. A virológiai kutatás mikroszkópos módszere.

1. Fénymikroszkópos vizsgálat: 1) himlővírus kimutatására (Morozov-féle ezüstözési módszer); 2) Zárványtestek kimutatása (ez a virionok felhalmozódása vagy a sejt vírusra adott reakciójának részei vagy termékei; lehetnek intranukleáris és citoplazmatikusak); 3) a vírus CPD kimutatása (kerekítés, fragmentáció, halál); 4) szimplasztok kimutatása; 5) dolgozzon a Q/C-vel; 6) szerológus értékelése. reakciók (ELISA, RGAd, RTGAd). 2. Lumineszcencia mikroszkóp: a lényeg, hogy UV sugárzással besugározva az atomok gerjesztődnek, majd fénysugárzás formájában energia felszabadulással a kiindulási állapotba kerülnek, ennek intenzitását keresztben értékeljük (smaragdzöld = ++ ++; zöld = ++ +; zöld-sárga = ++; sárga = +; nincs izzás = –) Besugárzás előtt a gyógyszert fluorokrómmal (FITC, acredin narancs, sárga, rodamin) festik. Ez egyszerű fluorokróm galvanizálás. Komplex – MFA Az MFA lényege sajátos. az antitest kölcsönhatása fluorokrómmal jelölt szérummal (konjugátum). 3. Elektronmikroszkópia: 1) bármely vírus kimutatása; 2) méretének, alakjának, szerkezetének, szimmetriájának, reprodukciójának tanulmányozása; 3) a vírus és a sejt kölcsönhatásának vizsgálata.

A virológiai laboratóriumban vírustörzsek izolálása, azonosítása és tenyésztése folyik, valamint különböző tudományos vizsgálatok zajlanak. Amikor vírusokkal dolgozik, először is:

1. A vírustörzsek idegen mikroflórával való szennyeződésének megakadályozása;

2. Biztosítani kell a dolgozók biztonságát az esetleges vírusfertőzésektől;

3. Biztosítani kell a környező lakosság biztonságát a szennyvízzel, kísérleti állatok tetemeivel stb.

A vírusfertőzésben szenvedő betegektől származó anyagok tanulmányozásakor ezeknek a betegségeknek a laboratóriumi diagnosztizálására különféle módszereket alkalmaznak:

· Elektron- és kisebb mértékben fénymikroszkópos módszerek;

· Módszerek vírusok izolálására és sejtkultúrákban történő tenyésztésére;

· Vírusok izolálására és tenyésztésére szolgáló módszerek fejlődő csirkeembriókban és érzékeny kísérleti állatok szervezetében;

· A vírusok azonosítása hemagglutináló képességük alapján;

· Különféle szerológiai kutatási módszerek: hagyományos és expressz módszerek;

· Molekuláris genetikai kutatási módszerek - molekuláris hibridizáció és polimeráz láncreakció.

1.1.2. Vírusfertőzésekre vizsgált anyagok

Az emberektől és állatoktól származó fertőző anyagok felvételekor figyelembe kell venni a vírusok tropizmusát bizonyos szövetek és szervek esetében, a vírus külső környezetbe való kibocsátásának útját és egy adott vírusfertőzés patogenezisének jellemzőit.

Léteznek pneumotróp, enterotróp, hepatotrop, limfotróp, neurotróp és dermotrop vírusok. A tropizmustól függően különféle anyagokat vizsgálnak. Például megvizsgálják a nyálkát a torokból, a köpetből stb., ha a vírus pneumotróp; bélmozgás - enterotróp vírusokkal; vezikulákból vagy pustulákból, kéregekből származó folyadék - ha a vírus dermotrop stb.

1.1.3. Vírustartalmú anyagok feldolgozása

A fertőző anyagokat a vírusok tropizmusának figyelembevételével és az aszepszis betartásával steril tartályokba helyezzük, gondosan lezárjuk, és jéggel ellátott termoszba helyezzük.

Javasoljuk, hogy a lehető leghamarabb vizsgálja meg az anyagot, mivel a vírusok gyorsan inaktiválódnak. A vírus tartósítását megkönnyíti, ha a vizsgálati anyagot (50%-os glicerines oldatban) hűtőszekrénybe helyezzük 5 o C-ot meg nem haladó hőmérsékleten. A legmegbízhatóbb módszer azonban a fagyasztott tárolás -45 o C és az alatti hőmérsékleten. ; ilyen körülmények között a vírus hosszú ideig életképes maradhat.

A vírusokat tartalmazó sűrű anyagok feldolgozása mozsárban történő őrléssel vagy speciális eszközökben - homogenizátorokban történő őrléssel kezdődik. Ezután sóoldatban 10%-os szuszpenziót készítünk, amelyet 2000-3000 fordulat/perc sebességgel 15-30 percig centrifugálunk a nagy részecskék ülepedése érdekében. A vírusok a felülúszóban maradnak, amelyet további vizsgálatoknak vetnek alá.

A folyékony vírustartalmú anyagot közvetlenül centrifugáljuk, és a felülúszót is megkapjuk.

Ha kétség merül fel a vizsgált vírust tartalmazó felülúszó bakteriológiai sterilitásával kapcsolatban, antibiotikumokat adnak hozzá az idegen mikroorganizmusok elpusztítására. Az antibiotikumok nem befolyásolják a vírusokat, és életképesek maradnak.

1.1.4.Mikroszkópos kutatási módszerek a virológiában

- Elektronmikroszkópia

Az elektronszkopikus készítményeket tisztított és koncentrált vírustartalmú szuszpenziókból vagy vírusokkal fertőzött szövet ultravékony metszeteiből állítják elő. A vírusos tárgyakat speciális szubsztrát fóliákra hordják fel, amelyeket tartóhálókra helyeznek. Az alaprétegnek nagyon vékonynak (legfeljebb 30 nm vastagnak), átlátszónak és kellően erősnek kell lennie, például kolloid szén. A fóliákat számos lyukkal ellátott rézhálóra kell felhordani (2-3 mm átmérőjű). A gyógyszereket ezután különféle módokon dolgozzák fel.

Fémszórásos módszerek kontrasztanyagok előállítására használják. A vákuum és magas hőmérsékletű körülmények között speciális eszközben képződő nehézfémek (arany, platina, urán stb.) gőzei hegyesszögben ráirányulnak a vírustartalmú gyógyszerre. A vírusok vékony fémréteggel vannak bevonva.

Negatív kontraszt módszer azon alapul, hogy ha a gyógyszert nehézfémek bizonyos sóival, például foszfovolfrámsav 1-2%-os oldatával kezelik, sűrűbb réteg jön létre, amely nem engedi át az elektronokat, és amelyben több elektron van. - jól láthatóak a vizsgált átlátszó tárgyak.

Ultravékony metszetek negatív kontraszttal kombinálva a legjobb a virionok finomszerkezetének tanulmányozására és a vírusok sejttel való kölcsönhatási szakaszainak tanulmányozására, ugyanakkor a legösszetettebb is. A vizsgált fertőzött szövetdarabokat vagy más vírust tartalmazó anyagot speciális fixálószerben (például ozmiumban) rögzítjük. Dehidratáljuk egymást követően növekvő erősségű alkoholokba helyezve. A mintákat speciális műanyaggal töltik meg, amelyből polimerizáció után szilárd átlátszó blokkok keletkeznek. A blokkokból speciális mikrotomon 10-20 nm vastagságú ultravékony metszeteket készítünk, amelyeket foszfor-volfrámsav oldatba helyezve kontrasztosítunk.

A fent leírt módszerekkel előállított preparátumokat transzmissziós elektronmikroszkóppal vizsgáljuk, melynek felbontása eléri a 0,2-0,3 nm-t. A készítmény képét egy elektronmikroszkóp fluoreszcens képernyőjén figyeljük meg, és speciális fényképezőlemezeket fényképeznek le, amelyekről lenyomatokat nyernek. Fogadott nagyítások: ×100000-×400000.

Pásztázó elektronmikroszkóp pásztázó elektronmikroszkóppal történik, amelyben egy vékony elektronsugár gyorsan áthalad a vizsgált tárgyon, azaz pásztázza a felületét. Ennek eredményeként másodlagos elektronok sugárzása keletkezik, amely egy katódsugárcsövön áthaladva egy tárgy háromdimenziós képévé alakul egy fluoreszkáló képernyőn.

A pásztázó mikroszkópia lehetővé teszi a virionok háromdimenziós képének készítését (a készítményt először fémekkel permetezzük), felületük szerkezetének részleteit megkülönböztetjük, de nem tárjuk fel belső szerkezetüket. A pásztázó mikroszkóp felbontása 7-20 nm.

- Fénymikroszkóp

A fénymikroszkópban nagy vírusok láthatók, amelyek mérete a mikroszkóp felbontásán belül van - legalább 0,2 mikron. Valamint intracelluláris zárványok a vírus által érintett szövetekben.

A nagy vírusok, például a himlővírusok és a zárványok kimutatása speciális festési módszerekkel történik, fáziskontrasztban, sötét látómezőben; Fluoreszcens mikroszkópot is alkalmaznak.

A nagy vírusokat Morozov-festéssel (ezüstözéssel) azonosítják. Az intracelluláris zárványok azonosításához az érintett szövetekből szövettani metszeteket, keneteket vagy lenyomatokat készítenek. Általában a készítményeket Romanovsky-Giemsa szerint festik, néha más módszerekkel. A Babes-Negri zárványok kimutatása az agy idegsejtjeiben veszettség idején a legnagyobb gyakorlati jelentőséggel bír. Ebből a célból a készítményeket Mann szerint megfestik.

Lumineszcens mikroszkóp. A nagy vírusokat, intracelluláris zárványokat és vírusantigének felhalmozódását tartalmazó anyagokból készített készítményeket fluorokróm festékek oldatával festik meg. UV-fényben végzett fluoreszcens mikroszkóppal az RNS genomiális vírusok akridinnarancsra festett felhalmozódása és az általuk képzett zárványok világító vörös szemcsékként láthatók a halványzöld sejtcitoplazma hátterében; A DNS genomi vírusok smaragdzöld fényt adnak.

Immunfluoreszcens módszer vírusok, intracelluláris zárványok és vírusantigének felhalmozódásán alapul, fluorokróm festékekkel jelölt specifikus antivirális antitestekkel. A kapott komplexek fluoreszcens mikroszkóp alatt világítanak.