Un focar fără precedent al epidemiei mortale de virus Ebola în Africa de Vest, care amenință să se răspândească pe continentul european. SIDA, care distruge zeci de milioane de oameni și alte boli teribile necunoscute anterior ale oamenilor, animalelor și plantelor. Unde ne cad pe cap? Ce rol joacă în asta laboratoarele secrete ale CIA și ale departamentelor militare americane?

„Nu se poate! Cancerul nu este contagios! Toate acestea sunt inventii, cum ar fi „teoriile conspirației” sau întâlnirile cu marțienii!” Așa au răspuns autoritățile americane acuzațiilor guvernului venezuelean că marele lider al Revoluției Bolivariane, Hugo Chavez, a fost distrus prin infectarea lui cu un virus canceros.

Cu toate acestea, experții consideră că un număr atât de mare de lideri latino-americani (și de stânga!) care s-au îmbolnăvit de cancer aproximativ în același timp nu poate fi explicat prin cauze naturale. Printre aceștia, alături de Chavez, se numără președintele argentinian Néstor Kirchner, care i-a succedat în funcție, Cristina Kirchner, președintele brazilian I. Lula da Silva, care a ajuns la putere după el, Dilma Rousseff, și președintele paraguayan Fernando Lugo (care a fost răsturnat în timpul o lovitură de stat de dreapta în 2012). , organizată de CIA; și la scurt timp după aceea diagnosticat cu cancer al sistemului imunitar). Liderul cubanez Fidel Castro abia a supraviețuit unui misterios cancer intestinal care l-a lovit după Summitul Poporului din 2006 din orașul argentinian Cordoba.

Puțini oameni știu că cu mult înainte de experimentele brutale ale lagărelor de concentrare din lagărele de moarte germane din timpul celui de-al Doilea Război Mondial, americanii au efectuat experimente similare asupra locuitorilor Americii Latine sub auspiciile Institutului Rockefeller pentru Cercetări Medicale.

Unul dintre fanatici, Cornelius Rhodes, i-a scris prietenului său în 1931: „Totul este minunat aici în Puerto Rico, cu excepția portoricanilor. Ei sunt, fără îndoială, cei mai murdari și leneși degenerați ai rasei de hoți care locuiește în această emisferă. Pentru sănătatea publică, sunt necesare unele mijloace pentru a le distruge pe toate. Și am făcut totul pentru a accelera acest proces - am ucis opt în timpul experimentelor și i-am infectat pe mulți cu cancer. Nu există asigurări de sănătate sau beneficii sociale aici - acest lucru este admirat de medici care sunt liberi să-și vindece până la moarte și să-și tortureze pacienții nefericiți.”

„Doctorul” a injectat intravenos substanțe biologice cauzatoare de cancer, iar cel puțin 13 pacienți au murit în urma acestor experimente crude.

În anii 1950, Rhodes a devenit director al programelor de cercetare a armelor chimice și biologice la Fort Detrick Army Center din Maryland, locuri de testare din deșertul Utah și Canalul Panama, apoi s-a alăturat Comisiei Americane pentru Energie, care i-a expus pe americani nebănuiți la radiații radioactive. pentru a determina nivelul de „radiație sigură” și apariția tumorilor maligne ca urmare a acestor experimente.

După moartea lui Rhodes, Asociația Americană de Cancer a stabilit un premiu în numele lui. Cu toate acestea, în 2004, în urma dezvăluirilor scandaloase ale experimentelor sale sălbatice, președintele asociației, S. Horwitz, a anunțat că cel mai înalt premiu pentru oncologii americani nu va mai fi asociat cu numele de Rhodos din cauza „naturei controversate. a activităților sale.”

Au existat un ban la duzină de astfel de ticăloși din știință în Statele Unite și au testat aproape toate infecțiile pe care le-au inventat, mai întâi în America Latină (fără a uita de experimentele pe propriii cetățeni). După război, domeniul s-a restrâns din cauza faptului că mulți au început să apeleze la URSS pentru ajutor medical și științific. Dar, după prăbușirea Uniunii Sovietice, s-au deschis perspective cu adevărat nemărginite pentru acești decojitori.

Obama a fost deja forțat de mai multe ori să-și ceară scuze țărilor din America Latină pentru experimente pe oameni în anii 40 și 50, care au dus la răspândirea sifilisului și a altor boli cu transmitere sexuală, infertilitate în masă și diverse epidemii. Cu toate acestea, o astfel de scuze (doar după publicarea unor dovezi de necontestat!) nu va resuscita milioanele de morți și victime ale bioterorismului american și nici nu va duce la încetarea unor astfel de „experimente” în viitor (conform principiului „dacă nu prins, nici hoț”).

De la sfârșitul anilor 60, a început dezvoltarea accelerată și crearea diferitelor modificări ale virusului cancerului. Lucrarea a fost coordonată cu Institutul Național al Cancerului, care a dezvoltat oficial tratamente pentru „boala secolului” și a participat neoficial la proiectele CIA de utilizare a virusului cancerului în scopuri militare și politice.

În ciuda semnării ceremoniale în 1972 la Moscova, Londra și Washington a Convenției privind interzicerea dezvoltării, producerii și stocării armelor bacteriologice (biologice) și toxinelor și asupra distrugerii acestora (BTWC), lucrările la Fort Detrick erau în plină desfășurare și până în 1977 erau produși 60 de mii de litri de viruși cancerigeni și imunosupresori.

Profesorii R. Purcell, M. Hillerman, S. Kragman și R. McCollum au participat activ la lucrări, care au folosit un „cocktail” al virusului hepatitei B în combinație cu o substanță oncogenă pentru experimente nu numai pe macaci rhesus și cimpanzei, dar de asemenea, asupra elevilor americani de la Școala de Stat Willowbrook pentru Copii cu Deficiență Mintală.
În 1971, compania farmaceutică americană Lytton Bionetics a încheiat contracte cu o serie de țări africane pentru a studia pacienții cu cancer cu limfom Birkett, asociat cu oncovirusul infecțios Epstein-Barr, precum și leucemia și sarcomul. Este curios că limfomul Birket a fost descoperit în vestul Ugandei pentru prima dată după ce acolo au lucrat laboratoarele Centrului Național al Cancerului din SUA, precum și alte instituții medicale sponsorizate de Rockefeller.

Unul dintre experți, R. King, a spus în anii 80 că specialiștii din Statele Unite infectau oameni cu sarcom pentru a „izola genomul virusului prin recuperare, hibridizare, recombinare a virusurilor, mutații și alte tehnici tehnice”.

În cadrul audierilor Comitetului Bisericii din Senat din 1975, dr. Charles Senseney, care lucra la laboratorul Fort Detrick, a recunoscut că CIA a folosit substanțe biologic active care au cauzat boli de inimă trecătoare și cancer pentru a distruge figuri nedorite. El a demonstrat mostre de arme cu care au fost infectate victimele vizate. Printre acestea se număra o umbrelă care trăgea săgeți în miniatură când era deschisă, precum și o pistoletă specială pentru a trage cu ace făcute dintr-o substanță toxică înghețată. Fiind la fel de groase ca părul uman și lungi de câțiva milimetri, aceste ace au trecut fără deteriorare prin țesătura îmbrăcămintei și, atunci când au fost injectate, au provocat o senzație dureroasă nu mai rea decât o mușcătură de țânțar, dizolvându-se instantaneu sub piele.

Printre „produsele noi” ale bioteroriştilor americani au fost demonstrate şi aerosoli pentru infectarea „ţintelor” cu boli mortale după pulverizarea din avioane, precum şi „viruşi săritori” răspândiţi prin insecte (purici, păianjeni, ţânţari) care sar sau zboară de la animalele infectate. la oameni. CIA a devenit, de asemenea, un „pionier” în metodele de infecție: prin injecții, inhalații, contact cu pielea îmbrăcămintei contaminate, prin sistemul digestiv prin mâncare, băutură și chiar folosind pastă de dinți.

O serie de experți consideră că unul dintre primii lideri politici antipatici de Statele Unite care a fost infectat cu o nouă armă biologică a cancerului a fost președintele Angolei, Agostinho Neto. A murit în Spitalul Clinic Central din Moscova în 1979, la vârsta de 57 de ani, dintr-o formă necunoscută până acum de cancer fulminant. O altă victimă a fost fostul președinte al Chile, Eduardo Frey, care s-a opus deschis protejatului american, generalul Pinochet. Frey a murit într-un spital din Santiago în ianuarie 1982, contractând o boală necunoscută, fulminantă, după ce a fost supus unui examen medical de rutină.

Deci, poate în 50 de ani arhivele CIA vor fi desecretizate, iar secretele morții lui Hugo Chavez și a altor lideri mondiali vor deveni cunoscute. Există o cantitate atât de mare de documentație despre utilizarea virusurilor canceroase de către agențiile de informații americane, încât existența acestor arme nu ridică nicio întrebare. Singura întrebare este cum a fost „introdus” și cine a fost autorul direct.

* * *

„În următorii 5-10 ani, va fi posibil să se creeze un virus sintetic care nu există deloc în natură și care nu poate fi suprimat de sistemul imunitar uman; Virușii noi, creați artificial, vor fi inaccesibili medicamentelor; este inutil să folosiți mijloace convenționale de tratare a bolilor infecțioase, antibiotice, vaccinuri și antidoturi împotriva acestora.” O astfel de declarație senzațională a fost făcută de expertul șef virolog al armatei D. MacArthur, vorbind în 1969 în fața comisiilor Congresului SUA („Comisia Sykes”), care trebuia să facă recomandări cu privire la alocarea fondurilor bugetare pentru armată. Și a cerut puțin - doar vreo 10 milioane de dolari!

Au fost alocați bani și sute de cercetători și experți au fost implicați în muncă. Unul dintre creatorii virusului SIDA a fost, se pare, doctorul Robert Gallo, care în 1987 a primit chiar un brevet de la Departamentul de Sănătate al SUA prin care își stabilește prioritatea în inventarea unui „virus care suprimă sistemul imunitar uman”.

Boala a scăpat din laboratoare și a fost descoperită pentru prima dată în primăvara anului 1981 în California (SUA). Și nu a avut nimic de-a face (cum încearcă să ne convingă americanii) cu Africa și „maimuțele verzi”.

În mai 1987, în London Times a apărut un articol care susținea că vaccinările împotriva variolei în Africa (inițiate de „umaniştii” din cadrul Departamentului de Sănătate al SUA) au provocat un focar de SIDA. Și milioane de oameni au fost vaccinați! Apoi, o „vaccinare” similară a fost efectuată în Haiti, Brazilia și alte țări.

Acuzațiile la adresa Statelor Unite de producere a virusului SIDA au început la mijlocul anilor '80. Profesorul la Universitatea Humboldt din Berlin, Jakob Segal, a susținut că virusul este „produsul unui experiment efectuat într-un laborator cu scopul de a crea o armă biologică”. În mass-media din SUA, toate acestea au fost prezentate ca „propaganda sovietică”. Dar în anii 90, însuși dr. Gallo a anunțat că a testat o altă tulpină „alternativă” de SIDA, care poate pătrunde în organism prin celulele epiteliale (adică prin piele), crescând riscul de îmbolnăvire prin pulverizarea substanță activă în atmosferă.

Dr. S. Monteith a fost unul dintre primii care, în 1981, a descris potențialul epidemic enorm al noului virus, consecințele potențial catastrofale ale utilizării lui de către „elita mondială” și a dovedit, de asemenea, natura sa artificială.

Și această nouă calitate a împiedicat până acum orice încercare de a crea un vaccin împotriva SIDA. De aceea, de-a lungul anilor, nu a fost creat niciun medicament eficient împotriva acestei boli.

Numărul de persoane infectate cu SIDA este încă necunoscut, deoarece chiar și în Statele Unite guvernul împiedică toate inițiativele care vizează chiar și un număr aproximativ. Potrivit diferitelor estimări, între 50 și 100 de milioane de oameni sunt infectați cu SIDA. Cel mai mult în Africa - în unele țări (Uganda, Kenya) peste 50% din populație suferă de această boală teribilă.

Se crede că aproximativ 40 de milioane de oameni au murit din cauza SIDA până în prezent - aproape același număr ca și în timpul celui de-al Doilea Război Mondial!

* * *

Potrivit Organizației Mondiale a Sănătății, peste 600 de persoane infectate cu Ebola au murit deja în vestul „continentului întunecat”.

Actualul focar al bolii a devenit cel mai mare din istoria observațiilor medicale.
În Nigeria, Liberia și alte țări africane, la granițe sunt instalate cordoane speciale, iar medicii îi monitorizează cu atenție pe toți cei care intră și ies. Febra Ebola este considerată o boală mortală la care oamenii, primatele și porcii sunt cei mai susceptibili. Nu există vaccin pentru el.

Epidemia a început în Guineea în martie a acestui an. Până în prezent, boala se răspândește în noi teritorii din Sierra Leone, Liberia și Mali. Există temeri că se va răspândi nu numai în toată Africa de Vest, ci și să pătrundă în Europa.

Este curios că în focarele epidemiei, cazurile de atacuri ale localnicilor asupra birourilor organizației internaționale Medici fără frontiere au crescut brusc. Localnicii acuză medicii că au adus virusul în regiune. Au existat demonstrații masive de protest împotriva guvernelor africane care nu fac nimic pentru a corecta situația.

Pogromurile birourilor unei „organizații internaționale respectate” sunt prezentate în presa occidentală ca exemple de „iraționalitate și absurditate”. Mai mult, „Doctori fără frontiere” își exaltă principiile etice în toate modurile posibile, asigurându-se că sunt „întotdeauna aproape de victime”. Dar nu sunt propriile lor victime, așa cum cred africanii „nerezonabili”?

De ce medicii occidentali nu părăsesc cu încăpățânare Guineea, Liberia, Mali și Sierra Leone? La urma urmei, aceste țări sunt cuprinse de haosul războaielor civile și al conflictelor, la care țările europene și Statele Unite iau parte activ. Numai Franța a cheltuit sute de milioane de euro pentru operațiuni militare din Mali.

Totul - pentru a restabili puterea colonială în vestul și nordul Africii. Și aceste teritorii sunt „curățate” de populația locală în timpul epidemiei de Ebola și a altor boli infecțioase. Mai mult decât atât, în mod surprinzător, doar localnicii suferă, dar nu „păscătorii păcii” din Franța.

Iar „medicii fără frontiere” nu transferă medicamente și echipamente autorităților locale și nu părăsesc zona de conflict. Acesta este exact ceea ce dă locuitorilor locali motive întemeiate să suspecteze „esculapienii” străini că ei sunt cei care răspândesc noi tulpini de infecție în rândul africanilor.

Potrivit multor experți, acolo sunt testate noi arme „etnice”, care acționează selectiv - numai asupra africanilor. Dar se pare că există modificări pentru alte grupuri rasiale și etnice. În 2006, unul dintre principalii virologi americani Eric Pianka, vorbind la o întâlnire ceremonială de la Universitatea din Texas, a spus că, cu ajutorul unei noi tulpini de febră Ebola (în cuvintele sale, „cu o letalitate fantastică”) este posibil „ pentru beneficiul planetei” pentru a reduce umanitatea cu 90 %. Virologii americani prezenți în sală s-au ridicat în unanimitate și i-au făcut ovație în picioare...

* * *

Începând cu anii 70, dezvoltarea accelerată a „armelor etnice” a fost realizată în Statele Unite. Și după cum cred mulți experți, acum au fost inventate noi tulpini de viruși mortali care se pot răspândi doar într-un anumit mediu etnic.

Astfel, „SARS” afectează mai ales chinezii și rezidenții din Asia de Sud-Est, Ebola și SIDA - africanii. Oamenii de știință israelieni încearcă să creeze o armă biologică similară îndreptată împotriva arabilor.

Asociația Medicală Britanică a declarat recent că „evoluțiile progresive în genetică ar putea duce la o curățare etnică la o scară fără precedent în următorii ani”.

Ideea de a stabili „dominația biologică asupra lumii” nu se mai maturizează nu numai în mintea virologilor canibali nebuni, ci în calculele politicienilor, strategilor militari și experților! Astfel, această idee a fost exprimată recent de respectabili politicieni neoconservatori americani în raportul „Noile frontiere pentru apărarea Americii”.

Se spune că, desigur, dominația militară asupra lumii trebuie în primul rând asigurată de rachete balistice și de croazieră, avioane controlate radio („drone”) și submarine și arme prin satelit. Dar, împreună cu aceasta, „în următorii ani, arta războiului în aer, pe uscat și pe mare va fi complet diferită de cea actuală, iar bătăliile vor fi purtate în noi dimensiuni - în spațiu, spațiul cibernetic, de asemenea ca la nivel intracelular și microbian”. Și mai departe se spune că „formele avansate de arme biologice, care vor selecta anumite genotipuri umane drept ținte, vor putea aduce această direcție din lumea terorii la locul care i se cuvine printre mijloacele justificate politic”!

* * *

Autoritățile americane au învățat bine lecțiile Proiectului Manhattan, în special, transferul de date privind armele atomice către Uniunea Sovietică de către cei mai importanți fizicieni ai lumii. Oamenii de știință americani au făcut acest lucru nu pentru bani, ci pe baza unei evaluări sobru a guvernului lor, care nu ar ezita să bombardeze URSS și toți ceilalți potențiali concurenți pe calea dominației mondiale.

Prin urmare, dezvoltatorii de noi viruși sunt acum supuși celor mai stricte reguli pentru eliminarea „martorilor indezirabili”. Rata mortalității în rândul acestora este de zeci de ori mai mare decât media statistică.

Experții americani independenți au numărat peste o sută de decese „misterioase” (în accidente de avion și de mașină, din boli „necunoscute”, „accidente”) în rândul virologilor și microbiologilor care lucrează în baza unor contracte pentru CIA și Departamentul Apărării.

În 2001, imediat după explozia „turnurilor de clătite”, toți americanii au fost alarmați de știrile scrisorilor care conțineau spori de antrax care au fost trimise la redacția revistelor, ziarelor, companiilor de televiziune și personalităților politice. 17 persoane s-au infectat, cinci au murit. Aceste scrisori au fost motivul principal al turnării politice care a îndreptat agresiunea SUA împotriva Irakului. Al-Qaeda a intrat în obscuritate, iar toate mass-media au raportat că „cel mai mare atac biologic din istoria SUA” a fost organizat de Saddam Hussein.

Când această întorsătură a fost cimentată (și ulterior folosită pentru a-l acuza pe Hussein de dezvoltarea armelor biologice, care au devenit unul dintre argumentele pentru invadarea Irakului), a devenit rapid clar că tulpina virusului putea fi obținută doar din laboratorul CIA din Fort. Detrick. Acolo au găsit o „vergă slabă” - virologul Bruce Ivins, care, fiind un catolic devotat, s-a plâns adesea că nu îi place munca sa din motive religioase. Și în iulie 2008, el s-ar fi sinucis înghițind droguri puternice. După aceasta, FBI l-a arătat drept un „terorist nebun” care a trimis scrisori cu infecție. Nu s-a făcut autopsie, nu s-a făcut nicio anchetă, iar cazul a fost închis rapid.

Interesant, el a repetat soarta unuia dintre microbiologii de top ai anilor 50, Frank Olson, care a lucrat și cu antraxul și și-a prezentat demisia de la Fort Detrick, nedorind să participe la dezvoltarea armelor letale. Și câteva zile mai târziu, în noiembrie 1953, conform raportului FBI, „într-o stare de criză nervoasă, a sărit de la etajul 10 al hotelului Pennsylvania”.

Unul dintre cele mai cunoscute cazuri a fost „sinuciderea” celui mai mare expert britanic în arme biologice, David Kelly. El a vizitat Irakul de zeci de ori ca parte a diferitelor misiuni ale ONU pentru inspecții. După invazie, a făcut o declarație senzațională (prima!) că toate „documentele” despre prezența armelor chimice și bacteriologice ale lui S. Hussein, prezentate de autoritățile americane și britanice la ONU și care au servit drept pretext pentru război. , erau „falsuri brute”. A fost chemat în parlament, unde în timpul audierilor, practic, nu i s-a permis să deschidă gura, atacându-l cu reproșuri și acuzații.

Câteva zile mai târziu, pe 17 iulie 2003, el, ca întotdeauna, a plecat la o plimbare de dimineață, iar cadavrul său a fost descoperit a doua zi la o milă de casă. Raportul oficial spunea că s-a sinucis înghițind 30 de somnifere și apoi tăindu-și o venă de la încheietura mâinii stângi cu un cuțit. Dar medicii de la ambulanță (se pare că nu știau despre „comandă”) au remarcat că nu era sânge sub cadavru. În consecință, Kelly s-a otrăvit, și-a tăiat o venă și apoi, sângerând, el însuși a ajuns la locul unde a fost găsit!

În Statele Unite, unul dintre cele mai notorii evenimente a fost prăbușirea avionului din martie 2002, în care a murit Stephen Mostow, un virolog de frunte care lucra la Centrul Medical din Colorado. I s-a zis „Domnul Gripa” pentru că s-a specializat mai ales în această boală.

Printre morți s-au numărat mulți oameni din țara noastră care, din diverse motive, au mers să „căuteze fericirea” în Occident. Cel mai vizibil a fost un „atac de cord” în 2001 la microbiologul V. Pasechnik, care era într-o sănătate de invidiat. Occidentul l-a folosit (ca mulți alți ruși) 200% - atât ca specialist, cât și ca „un dezvăluitor al conspirațiilor teribile ale Kremlinului împotriva Statelor Unite și a întregii lumi libere”.

În 1989, a plecat în Anglia și a lucrat acolo într-unul dintre centrele de virologie. Pe parcurs, a câștigat bani spunând povești despre „arma biologică binară” sovietică numită „Novichok”, că toți virușii cunoscuți au fost stăpâniți de mult în laboratoarele secrete ale KGB și au apărut deja alții noi. Ele pot provoca „boli monstruoase” precum scleroza multiplă și artrita la americanii nebănuitori.

Aceste povești de groază au fost utile pentru că au oferit o scuză pentru a stoarce fonduri bugetare pentru „bioapărare” (în realitate, pentru dezvoltarea de noi tulpini mortale). Dar apoi au decis că vorbăreața Pasechnik a vorbit prea mult despre centrul de virologie din Sailsbury, unde a lucrat timp de 10 ani, și l-a trimis într-o altă lume...

* * *

„Racheta lui Putin”, „mâna Moscovei”, „Putin, mi-ai ucis fiul!” - Reviste și ziare occidentale au fost pline de astfel de titluri după ce un avion de pasageri Boeing care zbura din Olanda către Melbourne a fost doborât pe cerul Ucrainei pe 17 iulie anul acesta. Această isterie a început imediat după discursul președintelui american Obama, care a spus că aceasta este o „crimă de proporții inimaginabile” și a dat vina pe Rusia. Imediat în mâinile secretarilor de presă ai Casei Albe și ai Departamentului de Stat au apărut câteva fotografii neclare care au fost primite de la CIA și „indicau în mod irefutat” că avionul de linie a fost doborât de o rachetă Buk rusă.

Acest eveniment a servit drept motiv pentru aplicarea pe scară largă a sancțiunilor economice împotriva Rusiei, implicarea țărilor UE (înainte de dezastru, acestea au ezitat dacă să sprijine Statele Unite), utilizarea aproape a tuturor mijloacelor de război interzise pentru a înăbuși rezistența. în Novorossiya (inclusiv bombe cu fosfor, rachete balistice, focoase cluster etc.), implementarea planurilor de constituire a unui bloc militar anti-rus cu participarea Ucrainei, Republicii Moldova, Poloniei, Georgiei și țărilor baltice.

Abia o lună mai târziu, au început să apară materiale că găurile din carlingă și din fuselaj au dovedit că avionul a fost doborât în ​​aer, cel mai probabil de un avion de luptă al Forțelor Aeriene ucrainene. Această versiune este confirmată de o schimbare bruscă a rutei Boeing imediat înainte de dezastru. Cu toate acestea, fapta a fost deja făcută, toată presa occidentală a uitat imediat de avion, iar sancțiunile și un război pe scară largă împotriva poporului rus din estul Ucrainei nu numai că sunt în vigoare, ci continuă să se intensifice.

Există toate semnele unui „eveniment declanșator” sau un „incident falsificat” (incident fals flag) - așa numesc maeștrii provocărilor de la CIA atacuri teroriste care sunt menite să îndrepte opinia publică în direcția necesară pentru Statele Unite. Statelor, pentru a declanșa un lanț de evenimente care vor duce la realizarea scopurilor „imperiu”. Acesta a fost întotdeauna cazul în istoria SUA – explozia propriului său cuirasat Maine, care a devenit pretextul pentru declararea războiului Spaniei în 1898; scufundarea planificată a vaporului de pasageri Lusitania pentru a intra într-un moment avantajos în Primul Război Mondial; suprimarea deliberată a informațiilor despre atacul iminent japonez asupra bazei americane de la Pearl Harbor în 1941 pentru a intra în al Doilea Război Mondial; provocarea prin bombardarea distrugătorului american Maddox în Golful Tonkin de a declara război Vietnamului în 1964; bombardarea Turnurilor Gemene în 2001 pentru a începe „Războiul împotriva terorii” și a pregăti invazia Irakului și Afganistanului.

Așa cum se întâmplă adesea în astfel de atacuri teroriste, nu se urmărește unul, ci mai multe obiective. În acest caz, de mare interes este informația că la bordul MH17 se aflau peste o sută de microbiologi care zburau către congresul internațional SIDA din Australia. Și printre aceștia se numără J. Lange, un virolog de frunte la Universitatea din Amsterdam.

„Pierderea ireparabilă a celui mai mare vizionar și titan în studiul SIDA”, „moartea tragică a celui mai important expert mondial în tratamentul bolii secolului”, au fost scrise în necrologurile publicate în reviste științifice. Și, într-adevăr, laboratorul lui Lange a ocupat o poziție de lider în studiul SIDA și metodele de tratare a acestuia, inclusiv utilizarea combinată a medicamentelor, terapia antiretrovială și a dezvoltat modalități de prevenire a transmiterii virusului de la mamă la copil. Timp de câțiva ani (2002–2004) a condus organizația internațională de combatere a SIDA. Alături de el la bord se aflau colegii săi olandezi Jacqueline van Tongeren, M. Adriana de Schutter, L. Vann Mens și alți oameni de știință. Este posibil să fi adus cu ei rezultatele multor ani de muncă, poate chiar un leac mult așteptat pentru această boală monstruoasă - până la urmă, cu puțin timp înainte de conferință, angajații lui Lange au spus că discursul său ar trebui să creeze senzație în lumea științifică. .

În același Boeing (se presupune că, prin coincidență fatidică), zbura reprezentantul Organizației Mondiale a Sănătății (OMS), Glenn Thomas, care a fost „amendat” prin acordarea unui interviu în care a menționat rolul criminal al organizației sale în răspândirea epidemia de Ebola din Africa de Vest.

Distrugând cercetătorii europeni în domeniul SIDA, precum și un funcționar cinstit al OMS, americanii au dat astfel o lecție tuturor celor care fac eforturi sincere pentru a vindeca SIDA și Ebola: „Nu este nevoie să tratăm și să prevenim aceste boli, sunt foarte utile pentru noi pentru distrugerea populației umane în proliferare.”

Nu este o coincidență că o serie de articole aminteau că în 1998, un avion Swissair s-a prăbușit peste Atlantic, în care se afla unul dintre străluciții cercetători SIDA, Jonathan Mann, și soția sa M. L. Clements, de asemenea un virolog celebru. Mann a condus structura OMS concepută pentru combaterea SIDA și, după cum au scris colegii săi, moartea sa a dat o lovitură puternică tuturor planurilor de organizare a luptei împotriva acestei boli groaznice. Cauzele dezastrului nu au fost încă clarificate (niciunul dintre experții serioși nu crede în versiunea oficială că unul dintre piloți a căzut mucului de țigară și asta a provocat un incendiu în interiorul avionului).

* * *

Statele Unite folosesc un arsenal imens de arme biologice împotriva noastră: OMG-urile și plantele și organismele transgenice (dintre care multe, potrivit experților occidentali, provoacă suprimarea sistemului imunitar, cancer, infertilitate și boli ale creierului), organizează anual zeci de epidemii de noi virusuri gripale, boli ale animalelor („gripa porcină” și „gripa aviară”), plante, răspândesc diverse boli alergice, vând medicamente și vaccinuri cu „efecte secundare” necunoscute nouă, aditivi alimentari etc. Se dezvoltă din ce în ce mai multe viruși noi: „hantavirusul” mortal, „virusul ucigaș australian” recombinant bazat pe variolă, o nouă generație de boli „non-fatale” (doar complet „incapacitante”), „bioregulatori” capabili să creeze depresie la scară masivă, să schimbe ritmurile cardiace și duc la insomnie. Este posibil să se creeze „marcaje” biologice - viruși latenți care ar trebui activați după un anumit timp.

În jurul Rusiei se creează laboratoare biologice militare americane: în Georgia (unde, potrivit experților, epidemia de pestă porcină a avut originea în 2013), Kazahstan, Kârgâzstan și statele baltice. Autoritățile americane alocă sume uriașe de bani atât pentru dezvoltarea de noi viruși, cât și pentru bioapărare (mai mult de 6 miliarde de dolari sunt cheltuiți anual doar pentru programul Bioshield).

În țara noastră, după prăbușirea Uniunii Sovietice, pentru o lungă perioadă de timp aproape nicio atenție a fost acordată acestei cele mai importante arii de protecție a țării. S-au închis institute și centre, tineri specialiști au plecat în Occident. Au rămas doar pasionați și oameni de știință în vârstă care lucrează pentru salarii mici (18 mii sunt cercetători seniori, 27 mii sunt profesori, doctori în științe).

Clădiri dărăpănate, echipamente învechite, „presiune suplimentară” din partea oficialilor liberali. S-a ajuns la punctul în care în 2000, pentru „plată insuficientă”, Mosenergo din Chubais a încercat să oprească electricitatea la Institutul de Virologie Ivanovsky. Nu numai că o colecție unică de microorganisme ar fi distrusă, dar unele dintre probele de virus ar putea scăpa în atmosferă! Apoi, doar prin minune am reușit să luptăm împotriva „managerilor eficienți”. Iar lovitura finală a fost dată de „reforma” Academiei Ruse de Științe - de fapt, lichidarea acesteia și transferul conducerii în mâinile unui contabil „eficient” din Krasnoyarsk.

Nimeni nu a intervenit în adevărata vânătoare a agenților CIA pentru oameni de știință patrioti, care au fost pur și simplu distruși pe teritoriul propriei noastre țări! În ianuarie 2002, A. Brushlinsky, membru corespondent al Academiei Ruse de Științe, director al Institutului de Psihologie, psiholog și biolog, autor de lucrări despre recunoașterea terorismului, a fost bătut până la moarte cu bâte de baseball (pentru ca ei să știe unde este ordinul). căci lichidare a venit din!) şi sugrumat la intrarea casei sale din Moscova. La doi ani după moartea sa, adjunctul său, profesorul V. Druzhinin, a fost ucis.

În noiembrie 2002, profesorul B. Svyatsky, specialist în infecții ale copilăriei de la Universitatea Medicală de Stat din Rusia, a numit după. Pirogov. Membru corespondent al Academiei Ruse de Științe Medicale, un virolog și microbiolog de frunte, specialistul în arme biologice L. Strachunsky, a fost bătut până la moarte cu bâte de baseball în 2005, în camera sa de la hotelul Slavyanka din Moscova. În 2006, geneticianul și biologul, membru corespondent al Academiei Ruse de Științe L. Korochkin a fost ucis.

O pierdere uriașă pentru microbiologia domestică a fost moartea șefului Departamentului de Microbiologie al Universității Medicale de Stat din Rusia, profesorul V. Korshunov, unul dintre cei mai importanți virologi din lume, un specialist recunoscut în „anti-arme” biologice. Omul de știință în vârstă de 56 de ani a fost bătut până la moarte de „huligani necunoscuți” în 2002, la câteva zile după publicarea unui articol de ziar în care se afirma că omul de știință se afla în pragul celei mai mari descoperiri - un vaccin universal împotriva oricărei arme biologice! Ca urmare a morții lui Korshunov, munca în cel mai important domeniu al științei a fost oprită. Sute, dacă nu mii de oameni din Rusia au fost sortiți morții din cauza opririi cercetării.

Paginile tragice ale istoriei moderne ne convinge că Statele Unite sunt capabile de orice, cele mai barbare și criminale acțiuni în dorința sa maniacă de dominare a lumii. Este semnificativ faptul că țările în care invadează sub pretextul „protejării drepturilor omului”, „umanismului” și „democrației” devin nu numai scena celor mai acute războaie civile, ci sunt și însoțite de epidemii de diverse noi, anterior boli necunoscute. Mase uriașe de oameni din Vietnam, Iugoslavia și Irak au fost expuși la substanțe mutagene, ceea ce a dus la consecințe teribile. Deformări teribile în rândul bebelușilor, crearea unei întregi generații de degenerați, modificări ireversibile la nivel genetic care vor afecta toate generațiile viitoare - acestea sunt câteva dintre consecințele „acțiunilor umanitare”.

Mai mult, organizațiile internaționale, inclusiv ONU, aflate în prezent sub controlul deplin al SUA, joacă rolul de „acoperire” în implementarea acestui genocid. Organizația Mondială a Sănătății (OMS), Medicii fără Frontiere și alte organisme anterior autorizate își scriu „rapoartele obiective” sub dictarea Occidentului și nu mai poate fi de încredere. Ei au acționat împreună cu agresorii din Irak, Afganistan și Libia.

În ajunul invaziei de către SUA a Irakului, ei au concluzionat cu ascultare că Saddam Hussein deținea „stocuri uriașe de arme biologice și chimice”, care a servit drept unul dintre principalele argumente pentru ca SUA să demareze un război. Anul trecut, ei au acuzat guvernul sirian că folosește arme chimice și biologice împotriva populației sale, când aproximativ 300 de persoane au fost ucise în august de gazul nervos sarin într-o suburbie din Damasc. Deși până atunci s-au primit dovezi puternice că sarinul a fost folosit de militanții al-Qaeda și a fost obținut nu de oriunde, ci din depozitele americane.

* * *

Distrugerea nemiloasă a concurenților și, de fapt, tirania biologică a Statelor Unite distruge suveranitatea țărilor periferice ale lumii, forțându-le să se bazeze pe ajutor, expertiză și medicamente din străinătate. O astfel de dependență colonială subminează securitatea popoarelor, le face ostatici ai Occidentului, „șobolani de laborator” pentru diverse experimente medicale și biologice îndreptate împotriva sănătății și vieții lor.

Singura contrabalansare a imperiului bioteror poate fi respingerea „globalismului” vicios și construirea unei lumi multipolare. Toate țările trebuie, pas cu pas, să refuze cooperarea cu Statele Unite și NATO, organizațiile internaționale pro-americane existente. Este necesar să se încheie acorduri la nivel interstatal. Astfel, în Africa, statele trebuie să lucreze împreună pentru a combate noile tulpini de Ebola introduse. În Asia de Sud-Est - împotriva celui mai acut nou sindrom de „SARS”. La nivel național trebuie să avem grijă de știința noastră, să ne creăm propriile institute și laboratoare naționale, centre științifice puternice pentru a contracara armele virale și genetice.

Nikolai Ivanov

Etapele diagnosticului de laborator al bolilor virale. Înființarea unui laborator de virologie.

1) Indicarea (detectarea) unui virus în material patologic:

Metode expres:

a) Detectarea virionilor:

(1) Microscopia electronică;

(2) Microscopie cu lumină (variola);

b) Detectarea Ags virali în reacțiile serologice (RIF, ELISA, RSK, RDP, RNGA);

c) Detectarea corpurilor de incluziune prin microscopie cu lumină și fluorescență;

d) Detectarea acizilor nucleici virali folosind sonde PCR și ADN;

e) Detectarea hemaglutininelor în RHA;

f) Detectarea activității infecțioase a virusului într-o probă biologică.

2) Izolarea (izolarea) virusului din materialul patogen. Izolarea se realizează indiferent de rezultatele primei etape folosind un test biologic în trei pasaje „oarbe”. Trecere este infectarea unui sistem viu pentru a obține o nouă populație de virus. Pasaj „orb”.– infecție fără semne vizibile de reproducere a virusului. După trei treceri, virusul se acumulează în celulele unui sistem viu, ceea ce este însoțit de apariția semnelor de reproducere, vizibile la nivelul macroorganismului. De exemplu, când test biologic pe animale: semne clinice, deces, modificări patologice; pe embrioni de pui– moarte, modificări patologice, hemaglutinare; pe cultură de celule– CPP, hemadsorbție, plăci, RIF, etc. Astfel de sisteme vii infectate sunt definite ca un biotest pozitiv. Cu toate acestea, nu este încă posibil să se determine cu exactitate tipul de agent infecțios. Prin urmare, materialul patologic este selectat dintr-o probă pozitivă, care este în mod convențional considerată secundară, adică. selectat dintr-un sistem viu cu semne de biotest pozitiv. Din aceasta se prepară o suspensie care conține virus sau tampoane de amprentă (virus izolat).

3) Identificarea (determinarea tipului) virusului izolat în reacții serologice sau prin analiză PCR. În cazuri rare, identificarea prin alte caracteristici este posibilă, de exemplu prin incluziuni intracelulare (corpii Babes-Negri pentru rabie).

4) Dacă este necesar, dovezi ale rolului etiologic al virusului izolat. În acest scop, se folosesc reacții serologice, în care virusul izolat este folosit ca antigen și probe perechi de ser sanguin în diluții în serie de două ori sunt folosite ca anticorpi. Un rezultat pozitiv, care demonstrează rolul etiologic al virusului izolat, este o creștere a titrului de anticorpi în a doua probă de ser sanguin de 4 sau mai multe ori comparativ cu prima.

5) Diagnosticul retrospectiv. În acest scop, se folosesc seruri de sânge pereche prelevate în stadiul de recuperare, care sunt testate în reacții serologice cu un antigen specific standard în conformitate cu diagnosticul preliminar al unei boli virale. O creștere de 4 sau mai multe ori a titrului de anticorpi în a doua probă în comparație cu prima indică un proces infecțios activ care are loc în corpul animalului în timpul perioadei de recoltare a sângelui. În acest caz, boala este cauzată de virusul la care s-a stabilit o creștere a titrului de anticorpi în seruri pereche.

Înființarea unui laborator de virologie.

Pentru a organiza un laborator de diagnostic, utilizați un compartiment izolat format din cel puțin 5-6 încăperi.

Pentru laborator este alocată o cameră luminoasă. Încăperile pentru lucrul cu material viral ar trebui să fie bine iluminate și să fie formate dintr-o pre-cutie și o cutie, separate printr-o partiție de sticlă cu uși. În cutii se pun doar mese, scaune și accesorii de lucru. Suprafața meselor este acoperită cu oțel inoxidabil, plastic sau sticlă, iar deasupra suprafeței de lucru sunt instalate lămpi bactericide. La intrarea în cutie se pune un covoraș dezinfectant cu burete de cauciuc înmuiat într-o soluție dezinfectantă. Sala de pre-box conține îmbrăcăminte sterilă și echipament adecvat pentru scopul boxului. Laboratorul este prevazut cu apa rece si calda si ventilatie cu alimentare cu aer steril.

Pentru a înregistra materialul patologic primit, este destinat recepţie, unde se așează mai multe mese tapițate cu tablă zincată și recipiente cu soluții dezinfectante (3% cloramină, hidroxid de sodiu sau 5% fenol).

În camera de preprocesare a materialelor ( deschidere) deschide cadavrele și selectează material pentru cercetări ulterioare.

Boxurile sunt echipate in functie de scopul lor.

Într-o autoclavă, vasele, mediile de cultură, echipamentele și mediile de cultură sunt sterilizate și materialul infecțios este neutralizat. Este necesar să existe două autoclave: pentru materiale curate și pentru cele infectate.

Spalatoria este amenajata pentru spalarea vaselor, a echipamentelor si a aparatelor.

Vivariul trebuie să aibă un compartiment de carantină, încăperi pentru animale sănătoase și de experiență și încăperi utilitare.

Pentru orice tip de laborator de virologie, o parte obligatorie a laboratorului este o cutie de masă sau, mai bine, o cutie cu alimentare cu aer laminar.

46. ​​Culturi celulare și tipurile lor. Un sistem în care celulele, țesuturile sau organele îndepărtate din organism își păstrează viabilitatea timp de cel puțin 24 de ore. Supraviețuire: în care celulele își păstrează doar activitatea inerentă de viață fără a se reproduce. În creștere: își păstrează activitatea inerentă de viață și sunt capabile de proliferare. După natura creșterii, acestea sunt împărțite în 3 grupe: suspensie; plasmă (culturi de bucăți fixe de țesut); un singur strat. Cele cu un singur strat sunt împărțite în 4 grupe: primar tripsinizate; subculturi; semi-saltabilă și intercalabilă. Suspensie: cresc sub formă de suspensii, celulele se înmulțesc cu un mediu special plus amestecare constantă folosind role. Celulele cresc pe toată suprafața saltelei. Un număr mare de celule pentru vaccinuri. plasma: bucăți de țesut fixate prin plasmă, aceasta este cultura de țesut. Se obține prin fixarea unei bucăți de țesut pe o sticlă virusologică, apoi adăugarea de mediu de groapă și cultivarea acestuia; în acest caz, creșterea celulară este înregistrată de-a lungul periferiei unei bucăți de țesut. Folosit pentru a obține bucăți de țesătură. Un singur strat: Pentru a indica un virus. Se obține din țesuturi sau organe prin tratarea acestora cu tripsină. Subculturile se obțin din cele primare prin altoire. Apoi, semitransplantat prin transplanturi multiple. Au un set diploid de cromozomi. Poate supraviețui diploid în funcție de vârstă sau țesut din care a fost obținută cultura celulară. Dacă embrionul este de până la 80 de zile. Pentru un adult - nu mai mult de 25 de transplanturi. Nu există mai mult de 5 vechi.Cele transplantate sunt celule mutante care sunt canceroase. Ele durează de un număr infinit de ori. Acestea sunt celule transformate ale unei tumori canceroase. Hela este cea mai faimoasă cultură celulară continuă din 1956. Această cultură este prezentă în toate laboratoarele din lume. Este adaptat la mulți agenți patogeni. Primii-născuți au o serie de avantaje: nu mor; rata de crestere mai mare; toate sunt omogene genetic. În laboptoria se mențin prin reînsămânțare dintr-un vas în altul.

59. CPD. Aceasta este o metodă de indicare a virusului în cultura celulară. CPD se referă la orice modificare a celulelor dintr-o cultură celulară sub influența unui virus care se reproduce în ele. Folosesc o mărire scăzută când mă uit la stratul superior al saltelei. Comparați celulele infectate cu cele neinfectate. Diferențele se pot extinde pe întregul monostrat sau numai în pete. Ele sunt evaluate în kristas sau puncte. Deci, dacă întregul monopol al CPU a suferit o modificare, acesta este estimat la 4 cruci; dacă ¾ - cu 3 cr; ½ cu 2 cr; ¼ - pentru 1 cruce. Formele CPD depind de proprietățile biologice ale virusului, tipul de celule, doza de infecție, condițiile de cultivare etc. Unii virusuri prezintă CPD după 2-3 zile, alții după 1-2. 3 forme de CPU: fragmentare– distrugerea celulelor în fragmente separate, care sunt separate de sticlă și trec în fluidul de cultură. Rotunjire– celulele își pierd capacitatea de a se atașa de sticlă, iau formă sferică, se separă și plutesc liber acolo unde mor. Formarea simptomatologiei– dizolvarea membranelor celulare, în urma căreia citoplasmele celulelor învecinate se contopesc, formând un singur întreg în care se află nucleii celulari. Astfel de formațiuni se numesc simplaste - celule polifage gigantice. Este necesar să se efectueze cel puțin 3 treceri oarbe pentru a aprecia prezența virusului în materialul de testat. Hemadsopțiunea este legătura dintre celulele roșii din sânge cu suprafața celulelor infectate cu virus.

51. Calculul titrului virusului după Reed și Mench. Titrarea virusului cu efect evaluat statistic cu calculul titrului prin citire și meniu. Pentru această metodă de titrare se poate folosi orice model biologic, dar acest model trebuie să fie sensibil la virusul care este titrat (culturi celulare, embrioni, animale de laborator). În funcție de efectul infecțios al modelelor biologice infectate, acestea sunt împărțite în următoarele: recunoscute clinic; în funcție de modificările patomorfologice; la moartea modelului; prin acumularea de hemaglutinină. Rezultatele muncii depind de doza de virus. S-a stabilit că doza de virus care provoacă 50 la sută din efectul infecțios este cea mai puțin susceptibilă la fluctuații și este cea mai determinabilă dintre toate dozele posibile. Titrul este exprimat în doze eficiente de 50%. Acesta este un DE de 50. În funcție de modelul biologic utilizat și de efectul obținut, doza de 50 la sută poate fi exprimată în următoarele unități: LD 50 – ID 50 ELD 50 EID 50 TsPD 50– aceasta este o doză citopatogenă de 50 la sută determinată în culturi celulare prin CPD. Dacă în sistemele infectate nu observăm 50 la sută din efectul că ID 50, atunci titrul se calculează prin citire și meniu: lg LD 50 = lg ECD - (% ani de ECD - 50%) / (% ani de ECD - % ani de ECD) TOATE ACESTEA MULTIPLITE CU multiplicitatea lg ori

36. Reguli și orele de funcționare într-un laborator de virologie. Toți elevii sunt instruiți și instruiți în siguranța tr. Este interzisă intrarea în spațiile de producție a persoanelor neautorizate, precum și intrarea fără halat și încălțăminte de schimb. Este interzisă ieșirea în afara laboratorului purtând halat și șapcă. Fumatul, mâncatul în laborator și păstrarea alimentelor. Toate materialele care intră în laborator trebuie considerate infectate. La sfârșitul lucrării, locul de muncă este pus în ordine și de-identificat complet. Etichetarea ustensilelor care conțin material infecțios. Mâinile care poartă mănuși sunt spălate într-un borcan cu o soluție de cloramidă 5%, apoi mănușile sunt îndepărtate și dezinfectate pentru a doua oară, dezinfectate și spălate. ra Activitatea virologului laboratorului este construită pe trei principii principale: preveni infectarea angajaților sau a persoanelor care lucrează cu materiale care conțin viruși. Preveniți contaminarea materialului (uneltele, ustensilele sunt sterile) curățarea localului cu o soluție dezinfectantă + lămpi cu ultraviolete. Preveniți transportul virusului în afara laboratorului (cu aer, ustensile, material solid și lichid). Pipetele și paharele trebuie aruncate în sterilizator. Eprubete cu viruși, țesuturi - într-o autoclavă. Nu deschideți centrifuga până nu se oprește. Trebuie doar să eliminați aerul din seringă folosind un tampon de bumbac cu 75% alcool. Este interzisă ventilarea încăperii folosind un sistem de ventilație cu filtru.

37. Măsuri de siguranță în cazul materialelor care conțin virusuri. Preveniți dispersarea virușilor în mediul extern. Preveniți contaminarea (contaminarea) materialului care conține virusuri cu microfloră străină. Asigurați siguranța personală. Pentru a respecta aceste cerințe, sunt necesare următoarele reguli de lucru: ​​fii atent și îngrijit; fii doar în halat și schimbă-te în garderobă; se lucrează numai cu manșete cu nasturi, o șapcă și o mască de tifon; menține cu strictețe curățenia și ordinea în laborator; nu ar trebui să existe obiecte străine pe desktop; Fumatul și mâncatul sunt interzise. Utilizați instrumente și ustensile sterile. Lucrați cu vase lângă flacăra arzătorului. Nu vă puneți degetele în gură. Dispozitive folosite în sterilizator. Colectați pipetele uzate într-un vas cu o soluție dezinfectantă. Colectați deșeurile solide sau lichide (vată) în recipiente speciale pentru dezinfecția ulterioară. Nu turnați deșeurile în chiuvete sau toalete.

33. Mecanismul acţiunii antivirale a interferonului. Interferonul nu are un efect direct asupra virusului. Afectează doar celula prin activarea sintezei anumitor enzime celulare. În special, enzima protein kinaza și 2,5 oligoasintetaza. Informațiile despre sinteza acestor enzime se află, de asemenea, în anumite regiuni ale genelor celulei și sunt, de asemenea, într-o stare represivă. Sub interfecțiunea aerului există dereprimarea genelor responsabile de sinteza protein kinazei și 2,5 iligoAs sintetazei. Și sinteza lor crește brusc. 1) sub aerul proteinei kinazei, factorul de inițiere este fosforat, ceea ce asigură legarea ARN-ului mesager viral de ribozom. Astfel, ARN-ul mesager viral nu poate contacta aparatul ribozomal al celulei, adică începutul translației. Și în cele din urmă, sinteza proteinelor și enzimelor virale devine imposibilă. 2) sub influența interferonului se activează sinteza 2,5 oligoAsintetazei, care catalizează sinteza acidului 2,5 oligoadenilic în celulă. Acest acid schimbă acțiunea nucleazelor celulare pentru a distruge ARN-ul mesager viral. Astfel, sub influența interferonului, apar următoarele: blocarea translației ARN-ului mesager viral; distrugerea ARN-ului mesager viral. Efectul inhibitor al interferonului asupra reproducerii celulare: interferonul în concentrații de la 0 la 1000 de unități per ml suprimă reproducerea unei game largi de celule în orice țesut. Interferonul reglează creșterea multor tipuri de celule, inclusiv culturile de celule primare și celulele tumorale. Se bazează pe suprimarea sintezei anumitor proteine ​​celulare și sinteza de noi proteine ​​de către interferon. Inter crește activitatea ucigașă a limfocitelor T. În doze mari, acestea inhibă formarea anticorpilor. Dozele mici, dimpotrivă, stimulează formarea de anticorpi. Krilling – celulele tratate cu doze mici de interf produc mai mult interfer decât celulele netratate. Doze prea mari - procesul opus.

35. Tipuri de interacțiune între virus și celulă. Productiv și abortiv. Productiv este împărțit în litic și latent. Productiv: Acesta este un tip de interacțiune în care se formează o nouă generație de virion în celulă. Dacă celula moare rapid după dobândirea unui nou virion, atunci aceasta este o cale litică productivă de interacțiune între virus și celulă. Dacă celula în care virusul crește mult timp își păstrează viabilitatea (prin înmugurire), atunci acesta este un produs al unui tip latent de interacțiune. Avortiv: Acest tip este reciproc atunci când reproducerea virionilor se oprește în orice stadiu, virionul nu se dezvoltă. Ca urmare a interacțiunii virusului cu celula, în celulă pot apărea următoarele modificări: degenerarea celulară– celulele se transformă mai întâi într-o formă neregulată, apoi se rotunjesc, apare granularitatea în citoplasmă, apoi fragmentarea nucleară apoi moartea celulară. Astfel de modificări se numesc CPP. În încrucișări: 4 încrucișări – eficiență 100%. Formarea simplastelor– celule multinucleate. Formarea corpurilor de incluziune– conţinând mb, ARN sau ADN intranuclear şi plasmatic. Transformarea celulelor– virusuri oncogene (retrovirusuri ARN). Reproducerea virusurilor oncogene într-o celulă nu este însoțită de CPD. Celula produce în mod constant un virus. Sinteza interferonului.

4. Rezistența virusurilor la factorii fizico-chimici. Rezistența virusurilor animale a fost relativ bine studiată atunci când sunt expuși la factori externi: temperatură, radiații, ultraviolete, ultrasunete, pH, formaldehidă, fenol etc. Pentru a proteja împotriva acestor influențe, virionii au o înveliș proteic. Structura și compoziția chimică diferite a învelișurilor proteice determină stabilitatea diferită a virusurilor. În funcție de aceste caracteristici, același factor poate distruge unii virioni complet și nu pe alții. De exemplu, solvenții organici: acei virioni în învelișul cărora nu există lipide sunt rezistenți la aceste substanțe, iar cei care conțin lipide sunt distruși rapid. Inactivarea virusurilor înseamnă pierderea completă sau parțială a activității lor biologice, care are loc ca urmare a acțiunilor factorilor fizici și chimici. Când acidul nucleic viral și proteina se schimbă, are loc inactivarea completă, adică pierderea tuturor proprietăților biologice ale virusului - își pierde numai proprietățile infecțioase și își păstrează imunogenitatea. Natura si amploarea agentilor de natura chimica si fizica care actioneaza asupra virusului depind de natura factorului de inactivare, de doza, timp indelungat, de tipul de virus. Când virusul este inactivat, poate avea loc fie scindarea proteinelor învelișului, urmată de dezintegrarea acestuia în unități separate, fie compactarea proteinelor menținând în același timp structura generală a învelișului. Clivajul se observa sub actiunea unui mediu acid si alcalin cu incalzire prelungita si scazuta.Coagularea si compactarea apar la expunerea la formaldehida, temperatura ridicata sau fenol. Depinde de concentrare și durată. Astfel, în unele cazuri, coagularea proteinelor este însoțită de distrugerea acizilor nucleari și virusul suferă o pierdere ireversibilă a infecțiozității. În alte cazuri, capacitatea virusului de a se reproduce este păstrată. Conservat cu glicerina.

60. PCR. Principiul metodei: se identifică o genă specifică unui virus dat - o secțiune a unei molecule de ADN care poartă informații pentru sinteza unei proteine. Această genă este apoi identificată în materialul de testat folosind PCR. Această reacție permite formarea unor copii suplimentare ale genei - amplificarea unei secțiuni de ADN într-o eprubetă. În funcție de scopul studiului, specia sau genul de mo poate fi identificată. Esența PCR: molecula de ADN este încălzită la 90-94 de grade. Ceea ce duce la distrugerea legăturilor de hidrogen dintre bazele azotate ale dublei helix și apoi răcit la 52 g în prezența enzimei ADN polimerază. O creștere ulterioară a ratei duce la sinteza unei noi molecule de ADN - un șablon complementar. Această procedură se repetă de mai multe ori, rezultând fragmente mai mari. Indicarea se realizează folosind electroforeză sau o sondă ADN marcată. Componente principale: ADN-polimiraza este termostabilă; oligonucleotidă de 20 de nucleotide; trifosfați; amplificator, sticlărie și reactivi pentru electroforeză în gel de agaroză. Configurare: obținerea unei probe de ADN. Pentru a face acest lucru, materialul studiat este suspendat în tampon sau apă distilată. Adăugați OH de sodiu și mențineți timp de 7 minute. Amestecul este neutralizat. Lizatul este centrifugat timp de 10 minute pentru a sedimenta particulele mari.Lichidul supernatant este utilizat pentru PCR. PCR este amplificarea unei anumite gene a unui fragment de ADN. Apoi se topește într-un termociclor timp de 3 ore. Indicarea amplificării - proba este supusă electroforezei într-un gel de agaroză pentru a separa ADN-ul. După 30 de minute, agaroza este polimerizată în aparat și se formează găuri în agaroză. Se iau 10 μl din amestec și se amestecă cu 5 μl de colorant. Amestecul se adaugă în godeuri și se efectuează electroforeza timp de 40 de minute. Placa este îndepărtată și colorată într-o soluție de bromură timp de 10 minute. Agaroza este apoi plasată pe un transiluminator și modelele de benzi rezultate sunt fotografiate. Benzile dezvăluite de radiațiile ultraviolete sunt fragmente de ADN.

49. Metoda de infectare a culturilor celulare. Indicarea virusurilor în culturile celulare. Infecție: în acest scop sunt selectate tuburi cu un monostrat celular continuu. Mediul de creștere este drenat și celulele sunt spălate de câteva ori cu soluție Hank. În fiecare tub se adaugă 0,2 - 0,1 ml de material viral și se distribuie uniform pe întregul strat de celule prin agitare. În această formă, tuburile sunt lăsate timp de 1 până la 2 ore la 22 sau 37 de grade pentru adsorbția virusului pe suprafața celulelor. Apoi materialul viral este îndepărtat din eprubete și mediul de întreținere este turnat în eprubetă (1-2 ml). După izolarea virusului, monostratul de celule se spală de 2 ori cu soluție Hank și apoi se toarnă mediul suport. Indicaţie: conform CPD; RGAd; prin formarea plăcii; incluziuni intracelulare; RECIF; microscopia electronică

54. RTGA. RGA. RTGA: esență– atunci când virusul este amestecat cu un ser special, virusul își pierde proprietățile hemaglutinante. Goluri– identificarea virusului izolat; detectarea anticorpilor în serul de testat și titrul acestora. Componente– pentru serovarianta directă: material care conține virus, ser specific, suspensie 1% de globule roșii, soluție salină pentru diluare. Pentru retrospectiv - ser de testare, antigen standard într-o anumită doză de 4 GAE (titru de diluare a virusului) 4 GAE - 1:32. Sistem– la fiecare diluție de ser se adaugă un volum egal de antigen standard (virus) în doză de 4 GAE. Contact 30 de minute la temperatura camerei. În fiecare godeu cu diluții de ser și o doză constantă de virus în 4 ha, se adaugă un volum egal de suspensie de globule roșii. Contact 30-60 min la temperatura camerei. Contabilitate reacţiile se desfăşoară în cristae. dacă este un plus, atunci nu există aglutinare; dacă sunt minute, atunci este hemaglutinare. Titrul de anticorpi din serul de testat este diluția maximă a serului care întârzie complet aglutinarea globulelor roșii.RGA: esență: în adsorbția virusului pe suprafața globulelor roșii, ceea ce duce la lipire. Scopuri: indicare; pentru titrarea virusului în haen. Componente: virus; 0,5 suspensie de globule roșii; soluție salină pentru preparare. Schema post: pregătiți o diluție de două ori a virusului; adăugați un volum egal de suspensie de globule roșii 0,5% la fiecare dezvoltare a virusului; contact 30-60 minute la temperatura camerei. Contabilitate: in crists. 4 criste – 100% aglutinare. 3 crist - 75% . 1 cruce – aglutinare. 1 haen este diluția maximă a virusului care poate provoca aglutinarea a 50% din celulele roșii din sânge.

57. ELISA. Esența: când antigenul + serul marcat se leagă, enzima descompune substratul. Se formează un complex antigen+conjugat pentru a forma un produs de reacție colorat, evaluat la microscop cu lumină sau vizual. Scop: identificare. Componente: material sifon viral, conjugat, substrat. Schema de fixare: culitra celulară se fixează cu acetonă răcită. Se usucă și li se aplică conjugatul. Se incubează 1-2 ore la o temperatură de 37 de grade într-o cameră umedă. Se spală cu soluție salină, se clătește cu apă distilată și se usucă. Se aplică câteva picături din soluția de substrat, se incubează timp de 5-10 minute, apoi se spală în soluție salină și se clătește cu apă subțire. Contabilitate: în acest caz, adică în prezența antigenului, după aplicarea conjugatului, se formează un complex antigen plus anticorp marcat cu o enzimă. După aplicarea substratului, acesta se descompune prin acțiunea unei enzime, formând un produs colorat clar vizibil la microscopul optic.

56. RSK. Esența: legarea unui compliment de complexul antigen plus anticorp. Absența complimentului gratuit în acest sistem este apreciată de reținerea hemolizinei în sistemul indicator. Obiective: identificare; detectarea anticorpilor și a titrului acestora în serul sanguin testat. Componente: 2 sisteme – 1 (material care conține virus; ser specific;) (ser de testare; antigen standard). 2) sistem hemolitic (indicator) - 2-3% suspensie de eritrocite de oaie este un antigen; hemolizina (serul hemolitic) este un anticorp. Anticorpii corespund antigenului. Și un compliment pentru o singură reacție: dacă este primul, atunci va exista o întârziere a hemolizei când complimentul va contacta sistemul studiat. Dacă în a doua, atunci globulele roșii sunt lizate, va exista hemoliză completă. Schema de instalare: reacția este mai întâi efectuată în sistemul studiat, apoi sistemul indicator este adăugat în aceeași eprubetă. Contabilitate: RSC pozitiv – hemoliză întârziată. Negativ – hemoliză completă.

7. Proteine ​​virale. Constă din aminoacizi. Compoziția proteinei virale depinde de ordinea de alternanță a aminoacizilor; această ordine este determinată de informațiile genetice conținute în genomul viral. Proteinele virale sunt împărțite în structurale și nestructurale. Proteinele structurale fac parte din virionii maturi. B non-structurale nu sunt incluse în virionii maturi, dar sunt obligatorii în anumite stadii de reproducere. StructuralNestructurale

8. Enzime virale. Sunt proteine ​​în natură. Ele pot fi asociate direct cu virionul, dar nu sunt asociate - nu sunt structurale. în ADN Pentru ARN: ADN-polimiraza dependentă de ARN - nu este prezentă în celulă, este necesară pentru „-” care conține ARN și ADN, care în familia vir a retroviridae conține o enzimă care transduce genomul viral se numește ADN-polimiraza dependentă de ARN. Această enzimă are denumirea: revertază, revers transcriptază. Enzime implicate în formarea proteinelor virale: proteaze, protein kenaze.

52. RN.Esență: Când virusul interacționează cu un anumit ser, virusul își pierde proprietățile infecțioase, capacitatea de a se multiplica în celule. Obiective: identificarea virusului izolat, detectarea anticorpilor în serul sanguin și titrul de anticorpi. Componente: material care conține virus, ser specific, model biologic. Dacă retrospectivă: ser de sânge testat, antigen standard, model biologic. Schema generală de configurare: se amesteca antigen si anticorp, contact 30-40 minute, maxim 2 ore la temperatura de 37-38 grade; un amestec de antigen plus anticorp este utilizat pentru a infecta un model biologic; observatie si contabilitate. Contabilitate: pH-ul pozitiv înseamnă viu, pH-ul negativ înseamnă mort.

53. RDP.Esență: același antigen și anticorp plasate la aceeași distanță unul de celălalt într-un gel de agar difuzează unul spre celălalt, formând un precipitat sub formă de dungă albă la punctul de întâlnire. Obiective: identificarea virusului izolat, detectarea anticorpilor în serul de testat. Componente: material care conține virus, ser specific, gel de agar. Pentru retrospectivă: test de ser sanguin, antigen standard, gel de agar. Schema de etapă: straturile de agar se prepară pe o lamă de sticlă, se prepară godeurile, componentele de reacție se adaugă în godeuri conform unei anumite scheme, sticla cu reacția este plasată într-un termostat la 37-38 C. Reacția se înregistrează după 48 de ore. O reacție pozitivă este formarea unei benzi albe de precipitare.

55. RGAd, RTGAd. RGAd: Esență:în adsorbția eritrocitelor pe suprafața celulelor infectate cu virus. Obiective: indicație de virus. Componente: cultura celulară infectată cu material care conține virus; suspensie de globule roșii . Schema de etapă: preinfectează o cultură celulară cu un singur strat cu materialul de testat. Culturile sunt drenate în mediul de cultură suport. Se spală cu soluție Hanks. Se adaugă o suspensie de globule roșii. Contact 5-15 minute la temperatura camerei. Contabilitate: efectuată la microscop cu lumină. Pozitiv – celulele roșii sunt adsorbite pe celule; negativ – globulele roșii plutesc liber. RTGAd: esenta: în legarea anticorpilor specifici la suprafața celulelor infectate cu virus, ceea ce duce la inhibarea adsorbției pe celulele eritrocitare. Obiective: identificarea virusului izolat. Componente: cultura de celule contaminate; ser specific; suspensie de globule roșii. Schema de etapă: o cultură celulară cu un singur strat este preinfectată cu un material inițial cu un singur strat care conține virus. Se toarnă într-un mediu de hrănire și se adaugă 0,8 ml de ser specific. Contact 20-30 minute. Se adaugă o suspensie de globule roșii. Contact 5 – 15 minute. Contabilitate: Pentru control, trebuie să instaleze RGA. Contabilizarea în tuburi experimentale: pozitiv - globulele roșii plutesc liber, negativ - globulele roșii plutesc și ele liber. Contabilizarea în tuburi de control cu ​​pozitiv – adsorbție, negativ – flotant liber.

6. Acizi nucleici virali.+ ARN este un acid nucleic viral care are și funcția de ARN informativ. Informațiile despre sistemul de sinteză a proteinelor din ARN+ sunt imediat transferate în ARN-ul genomic fără transcripție. -Virușii care conțin ARN sunt viruși cu ARN monocatenar care nu au funcția de ARN mesager; în astfel de virusuri, sinteza ARN mesager (transcripția) are loc pe șablon minus catenele de ARN genomic folosind o enzimă specifică virusului strâns asociată. cu gnome ARN, ARN-polimiraza dependentă de ARN. Există viruși care conțin atât catene de ARN plus, cât și minus, acestea includ adenovirusuri și paramixovirusuri. Informațiile genomice din ADN-ul dublu catenar sunt codificate pe ambele catene.Acizii nucleici sunt reprezentați de polinucleotide formate din nucleotide individuale. Cantitatea lor în acid nucleic variază. Fiecare nucleotidă constă din 3 subunități: un reziduu de acid fosforic, un carbohidrat și o bază azotată.

9. Structura virusurilor. Forme de bază. Tipuri de simetrie. Structura: ADN: de obicei dublu catenar, informațiile genelor sunt codificate pe ambele catene. ADN-ul viral poate fi aranjat într-o manieră liniară, circulară. Poate fi monocatenar. ARN virale: adesea monocatenar, mai rar dublu catenar. Aranjate liniar, în mod circular, fragmentate. De regulă, ele constau din 11-12 fragmente. ARN-ul vir monocatenar poate fi de două tipuri: ARN-uri plus și minus catenare (genom negativ).Tipuri de simetrie: localizarea subunităților proteice (caposmere) determină tipul de simetrie a virionului - elicoidal, cubic, combinat. Spirală Acesta este un tip de sim în care capsomerii sunt localizați în jurul acidului nucleic într-o manieră elicoidală. Virușii mari și unii viruși de dimensiuni medii au acest tip de sim. Forma: în formă de tijă, poliformă, sferică, ovală. La virusurile în formă de bastonaș, capsida este formată din capsomeri dispuși în jurul acidului nucleic în spire spiralate de același diametru, strâns adiacente între ele.La virusurile sferice, capsomerii sunt dispuși în spirală, dar de diametre diferite. Tip cubic: Majoritatea virușilor mici și o proporție semnificativă a virușilor de dimensiuni medii îl au. Forma unor astfel de viruși este sferică. Capsomerii capsidei sunt localizați în jurul nucleilor acizi ca în jurul unui corp izometric obișnuit. Învelișul proteic al unor astfel de viruși se apropie de forma unui icosaider, o față obișnuită cu 20 de fețe. Combinate tip de simetrie: constă din spirală și cubică. Toți fagii și unii virusuri complexe din familia coxviridae îl au. Au o înveliș exterioară cubică și o înveliș capside spirală. Fagii au un cap icoseindric și un proces spiralat.

18. Principalele etape ale primei faze a reproducerii virale. Aceasta este faza de infectare a celulei, in aceasta faza virionul trebuie sa intre in contact cu celula, sa patrunda in celula si sa se dezbrace. Primul stadiul de adsorbție a virionilor pe suprafața celulei se poate produce în două moduri: fizico-chimic (nespecific); receptor (specific). Calea fizico-chimică este determinată de interacțiunea forțelor electrostatice de suprafață care apar între grupurile de proteine ​​virale încărcate pozitiv și grupările de carboxine, sulfat și fosfat încărcate negativ ale peretelui celular. Receptor bazat pe interacțiunea specifică a receptorului proteic viral cu receptorii complementari de pe suprafața peretelui celular. Receptorii virușilor și receptorii celulelor sensibile la un anumit virus au o configurație complementară (ca o cheie a unui lacăt). Dacă celula nu este sensibilă, atunci reabsorbția nu va avea loc niciodată. Al doilea penetrare – apare în moduri diferite pentru diferiți virusuri: cu ajutorul viropexis; prin topirea scoicilor. Viropexis– această cale este similară cu pinocitoza. În primul rând, la locul de adsorbție pe suprafața celulei, are loc invaginarea peretelui celular al membranei, apoi marginile membranei se închid cu interiorul celulei, virionul cu toate membranele sale apare în vacuola celulară. De fuziune- în acest caz, zonele învelișului viral și ale membranei celulare care se primesc reciproc sunt topite sub acțiunea enzimelor specifice virusului și doar acidul nucleic viral apare în celulă, în timp ce rămășițele virusului sunt încorporate în celulă. plicul celular. Al treilea etapă– deprotenarea – eliberarea din membrane – depinde de căile de intrare a virusului în celulă. Dacă deprotonizarea nu este izolată ca etapă separată prin fuziunea membranelor, aceasta are loc concomitent cu pătrunderea virusului. Dacă pătrunderea se face prin viropexis, atunci eliberarea acidului nucleic viral din plicuri începe după distrugerea proteinelor, lipidelor și grăsimilor care alcătuiesc plicurile virale. Toate etapele depind de temperatură.

20. Transcriere. Aceasta este rescrierea informațiilor genetice din acidul nucleic viral în ARN-ul informației virale, nou sintetizat conform legilor codului genetic. (virusul trebuie să prezinte proteina celulei care se sintetizează și să fie convertit în ARN). Produsul final al transcripției este ARN-ul mesager viral. ARN-urile + monocatenar nu au transcrieri, dar ARN-ul lor viral genomic are informația vir ARN. În ARN-ul monocatenar, genomul nu poate îndeplini funcția de ARN mesager și ARN-ul său este transflexat folosind enzima specifică virusului ARN-polimiraza dependentă de ARN. DESEN!

21. Difuzare. Acesta este procesul de traducere a informațiilor genetice conținute în ARN-ul mesager viral într-o anumită secvență de aminoacizi. O translație are loc atunci când cele patru baze încorporate în ARN-ul mesager viral sunt convertite într-un cod de 20 de aminoacizi. Produsul final al traducerii sunt proteinele virale. Sinteza proteinelor are loc pe ribozomii celulari. Se compune din 3 faze: inițierea traducerii și începutul traducerii; continuare; terminare – sfârșit de difuzare. Inițierea se bazează pe formarea unui complex de componente necesare pentru începerea translației, adică complexul de inițiere se bazează și pe recunoașterea ribozomului de către ARN-ul mesager viral și legarea acestuia de anumite zone numite capac. Aceasta este guanina metilata. După ce a recunoscut capacul, ribozomul alunecă în jos pe molecula de ARN mesager până ajunge la locul unde începe decodificarea informațiilor.

5. Compoziția chimică a virusurilor. Virușii sunt formați din acizi nucleici (ADN, ARN). Acizii nucleici sunt reprezentați de polinucleotide formate din non-nucleotide individuale. Fiecare nucleotidă constă din 3 subunități: un reziduu de acid fosforic, un carbohidrat și o bază azotată. Proteine ​​virale : Compus din aminoacizi. Compoziția proteinei virale depinde de ordinea de alternanță a aminoacizilor; această ordine este determinată de informațiile genetice conținute în genomul viral. Proteinele virale sunt împărțite în structurale și nestructurale. Proteinele structurale fac parte din virionii maturi. B non-structurale nu sunt incluse în virionii maturi, dar sunt obligatorii în anumite stadii de reproducere. StructuralÎn funcție de localizarea lor în virion, proteinele virale sunt împărțite în următoarea grupă: proteine ​​capside - în capside; supercapsid b – în supercapsid (preponderent proteine, există și grăsimi și carbohidrați); proteinele matricei – proteine ​​ale stratului membranar; proteinele nucleului viral sunt reprezentate de enzime. Nestructurale– în funcție de funcțiile pe care le îndeplinesc, se împart în: regulator al expresiei genomului viral; inhibitori ai biosintezei celulare; inductori de distrugere a celulelor; precursori de proteine ​​virale proteine ​​vir structurale; unele enzime virale nu fac parte din virionii maturi. Lipide: sunt incluse în principal într-o parte a învelișului surercapside al virionului în virusurile complexe. Toate acestea nu sunt codificate de genomul vir și sunt de origine celulară. Sunt reprezentate de fosfolipide și glicolipide. Carbohidrați: fac parte din supercapside obol, nu sunt codificate de genomul viral și sunt de origine celulară, reprezentate de glicoproteine ​​și glicolipide . Enzime virale: Sunt proteine ​​în natură. Ele pot fi asociate direct cu virionul, dar nu sunt asociate - nu sunt structurale. Enzimele polimeraze timpurii și replicaze timpurii iau parte la etapa de schimbare a informațiilor. Sunt clasificați ca inhibitori ai biosintezei celulare. Enzime care transhibează genomul viral: în ADN care conțin viruși - ARN-polimirazele dependente de ADN sunt prezente în celulă; în unele cazuri este accesibilă virușilor, în altele nu. Poate fi de origine celulară sau virală. Virușii care conțin ADN care se reproduc în nucleu sunt de origine celulară. În citoplasmă - origine virală - specifică virusului.

Pentru ARN: ADN-polimiraza dependentă de ARN - nu este prezentă în celulă, este necesară pentru „-” care conține ARN și ADN, care în familia vir a retroviridae conține o enzimă care transduce genomul viral se numește ADN-polimiraza dependentă de ARN. Această enzimă are denumirea: revertază, revers transcriptază. Enzime implicate în formarea proteinelor virale: proteaze, protein kenaze.

13. Bacteriofagi. Virusul bacteriilor. Sunt cunoscuți bacteriofagi ADN și ARN. Majoritatea ADN-ului fagilor este dublu catenar. Fagii ARN sunt monocatenar. Acidul nucleic fagic este înconjurat de o capsidă poliedrică (cap), de care la mulți fagi este atașat un apendice (coadă). Diametrul capetelor este de aproximativ 60-95 nm iar lungimea proceselor este de 250 nm cu o grosime de 10-25 nm. Procesul servește ca o structură de atașare la bacterie. Interacțiunea dintre b și celulele microbiene este un proces biologic complex, al cărui rezultat depinde de proprietățile fagilor și se manifestă prin liza celulelor bacteriene. bacteriofagii sunt folosiți pentru diagnosticare (antrax); pentru tratamentul infecțiilor bacteriene; pentru prevenirea inf (salmoneloza). DESEN!

22. Replicarea ADN-ului viral.

23. Replicarea ARN viral. ARN monocatenar cu genom negativ:

25. Asamblarea virionilor și eliberarea lor din celulă.

: explozie, ruptură, distrugerea celulei în care s-au format virionii maturi (viruși simpli), celula moare. Structurile complexe ies prin înmugurire, adică ies prin peretele celular și se desprind. În acest caz, celula nu moare imediat, ci atunci când rezervele sale sunt epuizate

19. Faza a doua a reproducerii.Etapa eclipsei: stadiul schimbării informaţiei. În această etapă, funcția genomului celular este suprimată datorită faptului că acidul nucleic blochează virusul, iar enzimele virale blochează aparatul genetic al celulei și sistemele de sinteză ale celulei. Acest lucru face ca celula să nu mai reproducă propriile componente celulare și să treacă la reproducerea propriilor componente. Replicasele timpurii și polimirazele timpurii sunt implicate aici. Transcriere: Aceasta este rescrierea informațiilor genetice din acidul nucleic viral în ARN-ul informației virale, nou sintetizat conform legilor codului genetic. (virusul trebuie să prezinte proteina celulei care se sintetizează și să fie convertit în ARN). Produsul final al transcripției este ARN-ul mesager viral. ARN-urile + monocatenar nu au transcrieri, dar ARN-ul lor viral genomic are informația vir ARN. În ARN-ul monocatenar, genomul nu poate îndeplini funcția de ARN mesager și ARN-ul său este transflexat folosind enzima specifică virusului ARN-polimiraza dependentă de ARN. DESEN!Difuzare: Acesta este procesul de traducere a informațiilor genetice conținute în ARN-ul mesager viral într-o anumită secvență de aminoacizi. O translație are loc atunci când cele patru baze încorporate în ARN-ul mesager viral sunt convertite într-un cod de 20 de aminoacizi. Produsul final al traducerii sunt proteinele virale. Sinteza proteinelor are loc pe ribozomii celulari. Se compune din 3 faze: inițierea traducerii și începutul traducerii; continuare; terminare – sfârșit de difuzare. Inițierea se bazează pe formarea unui complex de componente necesare pentru începerea translației, adică complexul de inițiere se bazează și pe recunoașterea ribozomului de către ARN-ul mesager viral și legarea acestuia de anumite zone numite capac. Aceasta este guanina metilata. După ce a recunoscut capacul, ribozomul alunecă în jos pe molecula de ARN mesager până ajunge la locul unde începe decodificarea informațiilor. Replicarea ADN-ului viral: Replicarea ADN-ului dublu catenar: O moleculă de ADN dublu catenar este mai întâi separată în 2 catene separate folosind enzime nucleaze celulare, apoi ADN-ul de informații virale este format pe una dintre catenele ADN virale a cărei matrice este. Acest lucru se întâmplă cu ajutorul unei ARN polimeraze dependente de ADN-uri specifice virusului sau enzimei celulare. Apoi, ARN-ul informator viral se deplasează în ribozomul celular, unde are loc translația cu formarea de proteine ​​​​și enzime virale, inclusiv enzima ADN-polimiraza. Folosind ADN-polimiraza, oa doua catenă complementară de ADN este construită din nucleotidele celulare. În acest fel, sunt sintetizate noi molecule de ADN dublu catenar. Replicarea ADN-ului monocatenar: Catenele simple de ADN au polaritate pozitivă. Cu ajutorul enzimei ADN-polimirazei dependente de ADN-uri specifice virusului, pe matricea ADN monocatenar virală se formează o catenă minus complementară de ADN. Se sintetizează o structură cu dublu helix, care se numește formă replicativă. Apoi, pe șablon, catenele minus ale formei replicative formează plus catenele de ADN monocatenar prin deplasarea catenelor plus de ADN din forma replicativă. Replicarea ARN viral: ARN monocatenar cu genom negativ: Imediat după pătrunderea în celulă, transcripția are loc cu formarea de ARN inf viral plus. În aceasta este implicată enzima specifică virusului ARN-polimiraza dependentă de ARN. ARN-ul Vir inf este apoi tradus pentru a forma proteine ​​și enzima ARN-polimiraza. Ulterior, cu ajutorul ARN-polimirazei, pe matrice se formează catenele de ARN minus monocatenar fiice plus catenele de ARN informațional. ARN monocatenar cu genom pozitiv: După pătrunderea în celulă, plus ARN-ul se leagă imediat de ribozomi unde este tradus pentru a forma proteine ​​și enzime, inclusiv enzima ARN replicază. Apoi, sub acțiunea ARN replicazei, se formează o formă replicativă. Pe șablon, ARN-ul minus al formei replicative creează o imagine a catenelor de ARN plus prin deplasarea lor din forma replicativă. Replicarea ARN viral dublu catenar: sinteza ARN-urilor virale mesager are loc pe un model de ARN dublu catenar folosind enzima ARN-polimiraza dependentă de ARN. Transcriere pe un șablon de catenă de ARN, fiecare fragment este transcris separat. Apoi, ele sunt traduse pentru a forma proteine ​​și enzima ARN-polimiraza cu ajutorul acestei enzime pe catenele plus de ARN mesager pentru a forma catene minus complementare de ARN, adică ARN dublu catenar. Asamblarea virionilor și eliberarea lor din celulă: 2 strategii de asamblare, maturare și ieșire dintr-o celulă infectată: implementarea asamblarii și maturării în interiorul celulelor; combinație a ultimei etape de asamblare a virionului cu ieșirea din celula infectată.

Asamblarea se realizează prin agregare simplă, adică combinarea unei proteine ​​vir cu un acid nucleic are loc sub influența factorilor fizico-chimici, adică are loc auto-asamblarea. Se bazează pe unificare și recunoașterea specifică non-proteică și proteină-acid nucleic. Se formează o nucleocapsidă. Pentru virușii simpli, aici se termină procesul de auto-asamblare. În virușii complexi, procesul de autogenerare se desfășoară diferit. O parte din proteină merge la formarea nucleocapsidei, care se formează ca în virușii simpli, iar o parte din proteine ​​se deplasează în membrana celulară. Nucleocapsidul format se deplasează ulterior acolo. Și formarea unei învelișuri supercapside are loc atunci când virionul părăsește celula, adică nucleocapsidul este acoperit deasupra cu proteine ​​care s-au mutat în membrana celulară și la ieșirea grăsimilor și carbohidraților din celulă sunt încorporați în această înveliș exterioară. . Există două moduri de a ieși: explozie, ruptură, distrugerea celulei în care s-au format virionii maturi (viruși simpli), celula moare. Structurile complexe ies prin înmugurire, adică ies prin peretele celular și se desprind. În acest caz, celula nu moare imediat, ci atunci când rezervele sale sunt epuizate.

62-63. Variola de oaie și capră(genul Caprippoxvirus). Ectima contagioasă la oi și capre(genul Parapoxvirus).Familie: poxviridae. conţinând ADN. Caracteristici ale reproducerii: genomul virusului este foarte mare.Chiar și în celulele infectate, replicarea este finalizată după 6 ore. Penetrarea are loc prin fuziunea membranelor virale și celulare. După penetrare, ADN-ul dublu catenar este divizat și replicarea începe pe ambele catene de ADN simultan. Mai mult, sinteza componentelor virale are loc în citoplasma celulelor. Ansamblul virionului în citoplasmă. Ieși prin înmugurire.

2. Rolul virusurilor în patologia infecțioasă a animalelor. În prezent, bolile virale sunt de mare importanță în patologia infecțioasă a animalelor, oamenilor și plantelor. Rolul lor crește odată cu reducerea și eliminarea bolilor bacteriene, micotice și protozoare. Bolile virale reprezintă aproximativ 80% în medicină și 50% în medicina veterinară. Există peste 500 de boli cunoscute cauzate de viruși. Originea virală a fost stabilită în astfel de boli deosebit de periculoase precum febra aftoasă, pesta bovină, pesta porcină etc. Virologia poate fi împărțită în generală și specifică. Studii generale natura și originea virusurilor, clasificarea, structura și compoziția chimică a acestora, genetica și selecția, metodele de diagnostic și prevenire, bazele imunității antivirale. Private vir studiază numele și poziția sistematică a agenților patogeni specifici, structura, dimensiunea și stabilitatea virionului, terapie, metode de diagnostic și prevenire.

1. Istoria dezvoltării. Prima perioadă începe din cele mai vechi timpuri până în 1892. În această perioadă, virologia ca știință independentă nu a existat. Bacteriologii au studiat boli cu etiologie necunoscută. A doua perioadă - formarea virologiei ca știință în sine - acoperă 1892-1950. această perioadă a început odată cu descoperirea botanistului rus D.I. Ivanovsky (1898) privind filiabilitatea agentului cauzal al bolii mozaic de tutun. Ivanovsky, studiind etiologia bolii tutunului, a stabilit că această boală este cauzată de un microorganism minuscul special care trece prin filtre bacteriene. Este invizibil la microscopul optic. Nu crește pe medii de creștere artificială. Ulterior, MO similare au fost izolate de la alte plante, precum și de la animale și oameni. Au fost uniți într-un grup independent - ultravirusuri. În anii 1930, embrionii de pui au început să fie utilizați în practica virologică. În 1956, Stanley a reușit să împartă virusul în componentele sale principale - proteine ​​și acid nucleic. La sfârșitul anilor 40 ai secolului al XX-lea, crearea de micro-uri electronice Rudenberg. Iar cea ușoară a fost creată de Leeuwenhoek. Oamenii de știință sovietici care au contribuit la virologie: Jdanov, Lihachev, Syurin.

48. Metodă de obținere a culturilor celulare primare tripsinizate monostrat. Celulele cu un singur strat sunt necesare pentru a indica virusul. Se obține din țesuturi sau organe prin tratarea acestora cu tripsină. Cele monostratificate sunt împărțite în 4 grupe: primar tripsinizate; subculturi; diploide sau semi-altoite; altoite. Țesutul este zdrobit și dispersat cu enzima tripsina. Apoi tripsina este îndepărtată prin centrifugare și se adaugă un anumit volum de mediu nutritiv lichid în sedimentul rezultat. Celulele sunt crescute într-un singur strat - un monostrat - pe suprafața interioară a sticlei. Există o nevoie constantă de organe de la animale sănătoase. ȘI se folosesc embrioni de 9-112 zile. Ovoscopia. Prelucrarea cochiliei. Cu ajutorul foarfecelor, tăiați coaja deasupra marginii pugii. Embrionul este îndepărtat steril. Spălați cu soluția lui Hank. Se pregătește un sac piele-muscular. Spălați cu soluția lui Hank. Țesătura este mărunțită cu foarfece. Se transferă într-un balon de tripsinizare. Balonul se pune pe un agitator magnetic timp de 15 minute. Suspensia este răcită într-un vas cu gheață. Se filtrează într-un recipient de balon. Suspensia de celule este centrifugată timp de 10-15 minute. Tripsina este eliminată. Din sedimentul celular se prepară o masă combinată, se toarnă în tuburi de 1 ml și celulele sunt cultivate.

47. Soluții de bază și medii nutritive.După origine Există medii de hrănire naturale și medii de hrănire artificiale. Naturale - din cele biologic active: vitalitate embrionară, alantoică plus adaos de soluții echilibrate de sare. Artificial - preparat din componente individuale. Cel mai adesea se folosesc medii de alimentare universale sau pot exista unele speciale. Universal este mediu 199 și Igla mediu. Compoziția mediilor de artă ar trebui să includă aminoacizi, vitamine, enzime și soluții echilibrate de sare, uneori un indicator (roșu fenol). Esența indicatorului este detectarea virusului prin schimbarea culorii. Pe parcursul vieții celulei, pH-ul se schimbă în partea acidă. Într-un mediu acid, culoarea indicatorului se schimbă de la roșu purpuriu la galben. Serul sanguin normal este uneori adăugat în mediul nutritiv într-un volum de 100 la sută din volumul mediului nutritiv. Serul de sânge se numește factor de creștere. Se adauga pentru proliferarea celulara, numai in mediile de crestere . După scopul utilizării: mediu de creștere – ser inclus; de susținere – fără ser. Soluții echilibrate de sare: toate sunt derivate ale soluției saline. Folosit ca bază pentru prepararea mediului de groapă și pentru toate manipulările cu culturi celulare (pentru a spăla ceva). Acestea sunt soluțiile Hanks și Earle. Soluții de dispersie: pentru separarea celulelor de altele și a celulelor din sticlă. Soluții de pepsină, tripsină. Din sticlă - soluții versine. Soluția de versine leagă cationii de calciu.

50. Titrul virusului. Titrul virusului este cantitatea de virus, adică doza pe unitatea de volum de material care conține virus. 3 metode de titrare: 1 metoda: titrarea virusului în funcție de efectul infecțios al virusului cu efect evaluat statistic. Conform metodei de citire și menchu ​​​​sau după Kerber. Titrul este exprimat în doze de 50%. Acesta este ED50. Pentru această metodă de titrare se poate folosi orice model biologic, dar acest model trebuie să fie sensibil la virusul care este titrat (culturi celulare, embrioni, animale de laborator). În funcție de efectul infecțios al modelelor biologice infectate, acestea sunt împărțite în următoarele: recunoscute clinic; în funcție de modificările patomorfologice; la moartea modelului; prin acumularea de hemaglutinină. Rezultatele muncii depind de doza de virus. S-a stabilit că doza de virus care provoacă 50 la sută din efectul infecțios este cea mai puțin susceptibilă la fluctuații și este cea mai determinabilă dintre toate dozele posibile. Titrul este exprimat în doze eficiente de 50%. Acesta este un DE de 50. În funcție de modelul biologic utilizat și de efectul obținut, doza de 50 la sută poate fi exprimată în următoarele unități: LD 50 – Aceasta este 50% din doza letală primită pentru laborator, care este vie în ceea ce privește efectul letal. ID 50– aceasta este o doză infecțioasă de 50 la sută determinată pentru ca laboratorul să fie în viață pe baza semnelor clinice sau modificărilor patomorfologice. ELD 50- aceasta este o doză letală embrionară de 50% determinată pe embrionii de pui în funcție de anul rezultatului. EID 50– aceasta este o doză infecțioasă embrionară de 50 la sută determinată la embrionii de pui de modificări patomorfologice și acumularea de hemaglutinină. TsPD 50– aceasta este o doză citopatogenă de 50 la sută determinată în culturi celulare prin CPD. Dacă în sistemele infectate nu observăm 50 la sută din efectul că ID 50, atunci titrul se calculează prin citire și meniu: lg LD 50 = lg ECD - (% ani de ECD - 50%) / (% ani de ECD - % ani de ECD) TOATE ACESTEA MULTIPLITE CU factorul de diluție lg. Metoda 2 : asupra efectului infectios al virusului cu o evaluare a efectului unic. Cu metoda de formare a plăcii în cultura celulară, există un singur efect. Exprimat în unități formatoare de variolă sau unități formatoare de plăci PFU. Se prepară o diluție de 10 ori a virusului; selectați un model biologic sensibil; În fiecare diluție a virusului, cel puțin 4 embrioni sunt infectați. Titrul este calculat folosind formula T=a împărțit la V*n. a - numărul mediu de urme sau plăci. V este volumul conținutului de material = 0,2. n este gradul de diluare a virusului. Metoda 3: în funcție de efectul hemaglutinant al virusului în GAEN. Au pus RGA.

38.Principii de diagnostic de laborator al infecţiilor virale.

Studiile de laborator joacă un rol important în stabilirea diagnosticului bolilor infecțioase, prescrierea terapiei etiotrope și monitorizarea eficacității tratamentului. Procesul de diagnosticare specifică de laborator se bazează pe identificarea agentului patogen și a răspunsului organismului uman în timpul procesului infecțios. Se compune din trei etape: colectarea materialului, transportul acestuia (pinten nr. 39) și studierea lui în laborator: 1) Metoda virologică cuprinde două etape principale: izolarea virusurilor și identificarea acestora. Pentru a izola virusurile, se folosesc culturi celulare, embrioni de pui și uneori animale de laborator. Prezența virusului în culturile infectate este determinată de dezvoltarea degenerării celulare specifice, adică. efect citopatogen, detectarea incluziunilor intracelulare, precum și pe baza detectării unui antigen specific prin imunofluorescență, reacții pozitive de hemadsorbție și hemaglutinare. Virușii sunt identificați prin metode imunologice: reacția de inhibare a hemaglutinării, fixarea complementului, neutralizarea, precipitarea gelului, imunofluorescența. 2) Reacții serologice; 3) Metoda imunologică (biotestele); 4) ELISA și PCR. După primirea rezultatelor examinării și luând în considerare datele epidemiologice și clinice, se stabilește un diagnostic final.

39. Preluarea, pregătirea și transmiterea brevetului. Material pentru virolog. Cercetare.

Colectarea, transportul și examinarea brevetului. materialul este reglementat de legislația veterinară. La luare, se ia în considerare tropismul virusului - localizarea preferată a virusului într-o anumită boală și patogeneza. E timpul să ajungi într-un impas. material până la finalul cercetării sale - 2-4 ore. Dacă aveți nevoie de mai mult timp, păstrați-l (metode chimice - soluție de glicerol 50%, fizic - congelare), dar nu pentru luminiști. microscopie. Transport la special containere cu însoțitor document si curier. Pregătirea implică extragerea virusului din celule. Lichid material – filtrare și centrifugare. Pentru a curăța bacteriile - bacteriene. filtre si antibiotice (500-2000 unitati la 1 ml), pentru fungi - fungicide (25 unitati la 1 ml), se pastreaza 30-40 minute, se inoculeaza cu pitata. mediu (aerobi – MPA, MPB, MPZh, anaerobi – Kitta-Tarozzi, ciuperci – Chapeka, Saburo). Material brevetat dens: 1) luați material patentat 1-1,5 g; 2) se toaca cu foarfeca; 3) se spală cu steril. sticlă sau nisip într-un mortar; 4) suspensie 10% cu soluție Hanks; 5) congelați și dezghețați de 2 ori; 6)filtrare printr-un filtru de tifon; 7) centrifugare (3000 rpm, 15 min); 8) lichid supernatant – material care conține virus, este testat pentru bacterii (medii nutritive), se adaugă antibiotice și fungicide.

40. Metoda microscopică de cercetare în virologie.

1. Microscopie cu lumină: 1) pentru detectarea virusului variolei (metoda de argint Morozov); 2) Pentru a detecta corpuri de incluziune (aceasta este o acumulare de virioni sau din părți sau produse ale reacției celulei la virus; aceștia pot fi intranucleari și citoplasmatici); 3) detectarea virusului CPD (rotunjire, fragmentare, moarte); 4) detectarea simplastelor; 5) lucrul cu C/C; 6) evaluare de către serolog. reacții (ELISA, RGAd, RTGAd). 2. Microscopia de luminescență: esența este că atunci când sunt iradiați cu raze UV, atomii sunt excitați, apoi intră în starea inițială cu eliberarea de energie sub formă de radiație luminoasă, intensitatea acesteia este evaluată în cruci (verde-smarald = ++ ++; verde = ++ +; verde-galben = ++; galben = +; fără strălucire = –). Înainte de iradiere, medicamentul este vopsit cu fluorocromi (FITC, portocaliu acredin, galben, rodamină). Acesta este fluorocrom simplu placare. Complex - MAE.Esența MAE este specifică. interacțiunea anticorpului cu serul marcat cu fluorocrom (conjugat). 3.Microscopia electronică: 1) detectarea oricărui virus; 2) studiul dimensiunii, formei, structurii, tipului de simetrie, reproducerii acestuia; 3) studiul interacțiunii virusului cu celula.

În laboratorul de virologie se lucrează la izolarea tulpinilor de virus, identificarea și cultivarea acestora și se efectuează diverse studii științifice. Când lucrați cu viruși, trebuie în primul rând:

1. Preveniți contaminarea tulpinilor de virus cu microfloră străină;

2. Asigurarea securității personalului care lucrează împotriva posibilei infecții cu viruși;

3. Asigurarea siguranței populației din jur de infectarea cu infecții virale prin apele uzate, cadavrele animalelor de experiment etc.

La studierea materialelor obținute de la pacienții cu infecții virale, în scopul diagnosticării de laborator a acestor boli, se folosesc diferite metode:

· Metode de electroni și, într-o măsură mai mică, microscopie cu lumină;

· Metode de izolare și cultivare a virusurilor în culturi celulare;

· Metode de izolare și cultivare a virusurilor în embrioni de pui în curs de dezvoltare și în corpul animalelor sensibile de experiment;

· Identificarea virusurilor prin capacitatea lor de hemaglutinare;

· Diverse metode de cercetare serologică: metode tradiţionale şi exprese;

· Metode de cercetare genetică moleculară - hibridizare moleculară și reacție în lanț a polimerazei.

1.1.2. Materiale studiate pentru infecții virale

Atunci când luați material infecțios de la oameni și animale, este necesar să se țină seama de tropismul virusurilor pentru anumite țesuturi și organe, calea de eliberare a virusului în mediul extern și caracteristicile patogenezei unei anumite infecții virale.

Există virusuri pneumotrope, enterotropice, hepatotropice, limfotropice, neurotropice și dermotropice. În funcție de tropism, diferite materiale sunt supuse cercetării. De exemplu, ei examinează mucusul din gât, spută etc., dacă virusul este pneumotrop; mișcările intestinale - cu virusuri enterotropice; lichid din vezicule sau pustule, cruste - daca virusul este dermotrop etc.

1.1.3. Prelucrarea materialului care conține viruși

Materialele infecțioase, ținând cont de tropismul virusurilor și cu respectarea asepsiei, se pun în recipiente sterile, sigilate cu grijă și trimise la laborator, introduse într-un termos cu gheață.

Se recomandă examinarea materialului cât mai curând posibil, deoarece virușii sunt rapid inactivați. Conservarea virusului este facilitată prin introducerea materialului de testat (într-o soluție de glicerină 50%) într-un frigider la o temperatură care să nu depășească 5 o C. Dar cea mai fiabilă metodă este depozitarea congelată la o temperatură de -45 o C și mai jos. ; în astfel de condiții virusul poate rămâne viabil mult timp.

Prelucrarea materialului dens care conține viruși începe cu măcinarea lui într-un mortar sau măcinarea lui în dispozitive speciale - omogenizatoare. Apoi se prepară o suspensie 10% în soluție salină, care este centrifugata la 2000-3000 rpm timp de 15-30 minute pentru a sedimenta particulele mari. Virușii rămân în supernatant, care este supus unor studii suplimentare.

Materialul lichid care conține virusul este centrifugat direct și se obține și supernatantul.

Dacă există îndoieli cu privire la sterilitatea bacteriologică a supernatantului care conține virusul de testat, se adaugă antibiotice pentru a distruge microorganismele străine. Antibioticele nu afectează virușii și rămân viabile.

1.1.4.Metode de cercetare microscopică în virologie

- Microscopia electronică

Preparatele electronscopice sunt preparate din suspensii purificate și concentrate care conțin virus sau secțiuni ultrasubțiri de țesut infectat cu virusuri. Obiectele virale sunt aplicate pe filme de substrat speciale plasate pe plase de susținere. Filmele de substrat trebuie să fie foarte subțiri (nu mai mult de 30 nm grosime), transparente și suficient de puternice, de exemplu, carbonul coloidal. Filmele se aplică pe ochiuri de susținere din cupru (2-3 mm în diametru) cu numeroase orificii. Medicamentele sunt apoi procesate în diferite moduri.

Metode de pulverizare a metalelor utilizate pentru obținerea agenților de contrast. Vaporii de metale grele (aur, platină, uraniu etc.), formați într-un dispozitiv special în condiții de vid și temperatură ridicată, sunt direcționați într-un unghi acut asupra medicamentului care conține virus. Virușii sunt acoperiți cu un strat subțire de metal.

Metoda contrastului negativ se bazează pe faptul că, atunci când medicamentul este tratat cu anumite săruri ale metalelor grele, de exemplu, o soluție de 1-2% de acid fosfotungstic, se creează un strat mai dens care nu permite trecerea electronilor și în care mai mulți electroni. -obiectele transparente aflate în studiu sunt clar vizibile.

Secționare ultrasubțire combinată cu contrast negativ este cel mai bun pentru studierea structurii fine a virionilor și studierea etapelor de interacțiune a virusurilor cu celula, dar în același timp este și cea mai complexă. Bucățile examinate de țesut infectat sau alt material care conține virusuri sunt fixate într-un fixativ special (de exemplu, osmiu). Se deshidratează prin plasare secvenţială în alcooli cu putere crescătoare. Probele sunt umplute cu plastic special, după polimerizare din care se formează blocuri solide transparente. Din blocuri se prepară secțiuni ultrasubțiri cu grosimea de 10-20 nm pe un microtom special.Secțiunile rezultate se contrastează prin plasarea lor într-o soluție de acid fosfotungstic.

Preparatele preparate prin metodele descrise mai sus sunt studiate la un microscop electronic cu transmisie, a cărui rezoluție ajunge la 0,2-0,3 nm. Imaginea preparatului este observată pe ecranul fluorescent al unui microscop electronic și sunt fotografiate plăci fotografice speciale din care se obțin amprente. Măriri primite: ×100000-×400000.

Microscopie prin scanare electronica se efectuează folosind un microscop electronic cu scanare, în care un fascicul subțire de electroni se deplasează rapid peste obiectul studiat, adică scanează suprafața acestuia. Ca rezultat, apare radiația electronilor secundari, care, trecând printr-un tub catodic, este transformată într-o imagine tridimensională a unui obiect pe un ecran fluorescent.

Microscopia de scanare face posibilă obținerea unei imagini tridimensionale a virionilor (preparatul este mai întâi pulverizat cu metale), pentru a distinge detaliile structurii suprafeței lor, dar nu dezvăluie structura lor internă. Rezoluția unui microscop de scanare este de 7-20 nm.

- Microscopie cu lumină

Într-un microscop cu lumină puteți vedea viruși mari, ale căror dimensiuni se încadrează în rezoluția microscopului - cel puțin 0,2 microni. La fel și incluziuni intracelulare în țesuturile afectate de virus.

Virușii mari, de exemplu, poxvirusurile și incluziunile sunt detectate folosind metode speciale de colorare, în contrast de fază, într-un câmp vizual întunecat; Se folosește și microscopia fluorescentă.

Virușii mari sunt identificați prin colorarea Morozov (argintire). Pentru a identifica incluziunile intracelulare, se prepară secțiuni histologice din țesuturile afectate, frotiuri sau amprente. De obicei, preparatele sunt colorate conform Romanovsky-Giemsa, uneori prin alte metode. Detectarea incluziunilor Babes-Negri în celulele nervoase ale creierului în timpul rabiei este de cea mai mare importanță practică. În acest scop, preparatele sunt colorate conform lui Mann.

Microscopia de luminescență. Preparatele preparate din materiale care conțin viruși mari, incluziuni intracelulare și acumulări de antigene virale sunt colorate cu soluții de coloranți fluorocromi. Cu microscopia fluorescentă în lumină UV, acumulările colorate cu acridină portocalie de virusuri genomice ARN și incluziunile pe care le formează sunt vizibile ca granule roșii luminoase pe fundalul citoplasmei celulare de culoare verde pal; Virușii genomici ADN emană o strălucire verde smarald.

Metoda imunofluorescentă se bazează pe combinația de virusuri, incluziuni intracelulare și acumulări de antigene virale cu anticorpi antivirali specifici marcați cu coloranți fluorocromi. Complexele rezultate strălucesc la microscopie cu fluorescență.